书城保健养生实用维生素矿物质安全手册
14987300000004

第4章 水溶性维生素

一、维生素B1(硫胺素)

(一)分子结构

硫胺素是一种对热和酸相对稳定的水溶性化合物,由1个嘧啶环和1个噻唑通过亚甲基桥连接而成。硫胺素衍生物包括单磷酸酯、焦磷酸酯和三磷酸酯形式以及合成的盐酸盐和水溶性稍差的单硝酸盐形式。分子结构。

(二)膳食营养素参考摄入量(DRIs)

机体对硫胺素贮存能力有限,因此需要经常性摄入。硫胺素需要量取决于能量消耗情况。英国COMA(1991)制定的成人和大于1岁儿童的RNI分别是0.4mg?1000kcal*和0.3mg?1000kcal。假定每日摄入食物8360kJ(2000kcal),硫胺素在烹调过程中的丢失率为20%,这样男性和女性的每日摄入量分别为1.4mg和1mg。在妊娠期和哺乳期,硫胺素需要量增至1.6~1.8mg/d。美国成年男性和女性的RDA分别为1.2mg/d和1.1mg/d,妊娠期和哺乳期妇女增至1.4mg/d。

中国制定的DRIs规定,成年男性和女性的RNI分别为1.4mg/d和1.3mg/d,孕妇和乳母的RNI分别增加到1.5mg/d和1.8mg/d。成人的UL为50mg。

(三)可能摄入量的估计

1.国外膳食调查结果

英国

总摄入量:

膳食 平均:1.50mg/d(摘自1986?87NDNS)

97.5百分位数:2.6mg/d

补充剂 最高300mg/d(OTC,2001)

估计每日最高摄入量:2.6+300=303mg/d

2.中国膳食调查结果

膳食中的摄入量(均数±标准差):(1.2±0.5)mg/d(资料来自第三次全国营养调查)

(四)毒理学研究

1.临床研究

(1)概述 一般认为口服硫胺素及硫胺素衍生物对人体的毒性很低,多数关于硫胺素副作用的报道发生于肠外营养后。大剂量口服硫胺素后危险度评定的研究资料尚缺少系统性,仅有个别的病例报道,口服大剂量盐酸硫胺素(≥7000mg)可引起头痛、恶心、易激惹、失眠、脉速及无力等症状。停药或减少剂量后症状减轻。较低剂量硫胺素导致不良作用的病例报告更少,其中一名患者在摄入17mg/d的盐酸硫胺素后出现肌肉颤动、脉速和神经应激过度;另一患者反复摄入剂量为100mg/d的硫胺素15d,2个月后一次性口服剂量为200mg/d的硫胺素,出现过敏反应并立即死亡;第三个病人患有与硫胺素相关的接触性皮炎,在口服200mg硫胺素的激发试验后湿疹加重;第四个病例一次性口服硫胺素后发生过敏性脑炎(剂量及剂型不明)。

没有明确的证据表明硫胺素及其衍生物可影响人体生殖功能。

在一项补充剂实验中,一个先前通过肠外途径补充盐酸硫胺素的隔离受试者,在补充200mg/d剂量的盐酸硫胺素不到一周后,即出现恶心和失眠症状,剂量减半后症状消失。

(2)特别重要的临床研究 Mills(1941)报道了一位47岁妇女每日摄入10000mg的盐酸硫胺素(给药途径不明)持续2.5周后,出现了硫胺素的相关毒性,报道的症状与过量甲状腺提取物导致的症状相似:如头痛、易激惹、失眠、脉速、无力、震颤,停药2d后症状消失,但4.5周后患者继续摄入剂量为5mg/d的硫胺素时,症状重新出现。停药后症状再次很快缓解。在同一份报告中,Mills还描述了一个盐酸硫胺素的平均摄入量为17mg/d的青年女性(给药途径不明)出现与甲状腺机能亢进相似的症状,如肌肉震颤、脉速以及神经应激性过高等。据报道这名女性通过尿液排泄的硫胺素为12mg/d,而且粪便中有强烈的硫胺素气味。

Meador等人(1993)的研究旨在评价补充硫胺素的可能有利的作用,受试者是平均年龄为69岁的Alzheimer病患者(9男,8女)。给予患者递增剂量的盐酸硫胺素,最大剂量为6000~8000mg/d,为期5~6个月。据报道,除两名受试者在7000mg/d和7500mg/d的剂量水平出现恶心、消化不良外,受试者能很好的耐受这些剂量,未出现无力等副反应。随后这些受试者恢复原先的最高耐受剂量(6500mg/d,7000mg/d)后也没有出现副反应。这项研究的局限性在于受试人数少,而且客观的精神测试显示17名受试者中有8人患有明显的精神疾病,因此有些影响可能未被发现。

Gokhale(1996)对556名患有中重度痉挛性痛经的印度女性(年龄12~21岁)进行了一项随机双盲、安慰剂对照试验。受试者硫胺素的营养状况不明。每日给予100mg的盐酸硫胺素90d后接着给予安慰剂持续60d,或先给安慰剂再给盐酸硫胺素,都未见不良反应的报道。

2.动物实验

(1)概述 动物的毒性数据有限。硫胺素的急性毒性很低,但一次口服剂量为3000~5000mg?kg的硫胺素或盐酸硫胺素对大、小鼠而言是致死性的。硫胺素硝酸酯的急性毒性更低,一次性口服剂量为5000mg?kg的硫胺素对大鼠没有毒副作用。没有高剂量水溶性硫胺素衍生物的慢性和亚慢性毒性数据。

(2)特别重要的动物实验 Molitor(1942)报道,大鼠的硫胺素致死剂量为100mg(假定体重为20g,约相当于5000mg?kg)。

Leuschner(1992)报道,经口给予雌性NMRI小鼠(体重为21~28g)剂量为5000mg?kg的硫胺素硝酸酯(包含于0.8%的羟丙基甲基纤维素含水凝胶中),未观察到有毒性作用,但受试动物数量不明。

3.致癌性及致畸性

没有关于硫胺素致癌性的报道。在多项细菌突变试验和体外染色体畸变试验中没有发现盐酸硫胺素有致突变作用。

(五)相互作用

维生素B1可以降低汞的毒性。有些学者证明汞中毒引起的多发性神经炎,通过维生素B1的治疗,症状很快消失。

酒精可破坏硫胺素的利用,导致酗酒者常发生硫胺素缺乏症。乙醇还可降低细胞硫胺素焦磷酸激酶的活力。

硫胺素是乙酰胆碱的拮抗剂,因此硫胺素可提高神经肌肉阻断剂的效应。

5-氟尿嘧啶对硫胺素的拮抗作用可能是通过对磷酸化的竞争作用来实现的(磷酸化对两者活性的发挥都是必需的)。

如服用利尿剂(如速尿)时,应额外补充维生素B1.

(六)摄入安全性的总评价

膳食中的硫胺素能被有效地吸收。但由于转运机制的可饱和性,水溶性补充剂(如盐酸硫胺素和硫胺素单硝酸酯)的吸收性很差。一般认为口服硫胺素对人体的毒性很低。大多数数据是可能来自与硫胺素相关的不良反应的病例报告或旨在研究硫胺素潜在有利作用的补充剂试验。

有限的人群资料表明硫胺素的不良反应一般与中枢神经系统有关,且仅在很高剂量时出现。少数个体可能在较低剂量时出现过敏反应,但这些较低剂量的病例报告也很罕见,且可能是经肠外给予硫胺素后易于出现的不良反应(如过敏症)。

动物实验资料非常有限。给予啮齿类动物致死剂量的硫胺素,往往会导致中枢神经系统症状,如休克、肌肉震颤、惊厥、呼吸紊乱或衰竭,与人类急性硫胺素中毒的症状相似。

美国FNB尚未发现用于制定最低毒副反应水平(LOAEL)的人群或动物口服硫胺素的资料。由于还没有发现口服硫胺素的不良反应,故无法制定LOAEL和NOAEL。因此美国FNB没有设定UL。

欧盟SCF发现注射硫胺素后产生不良反应,但口服硫胺素未见不良作用,因此欧盟SCF认为没有必要设定UL。

英国EVM 发现在一项小型临床试验中每天口服6000~8000mg硫胺素5~6个月后没有发生不良反应。给予556名年轻女性100mg硫胺素60~90d后没有发生不良反应,因此英国EVM将硫胺素补充剂的指导剂量(GL)定为100mg。

(七)各国硫胺素补充剂最高安全剂量的比较

美国CRN的ULS(OSL法)100mg

欧盟的最高补充剂量 尚未制定(截至2004年5月)

英国EVM关于补充剂的GL 100mg

中国营养素补充剂的最高剂量* 20mg

参考文献

COMA(1991)。DietaryReferenceValuesforFoodEnergyandNutrientsforthe UnitedKingdom。ReportofthePanelonDietaryReferenceValues,Committee on MedicalAspectsofFoodandNutritionPolicy。HMSO,London

Gokhale,LB(1996)。Curativetreatmentofprimary(spasmodic)dysmenorrhea。 IndianJournalofMedicalResearch103,227~231

Iber,F。L。,Blass,J。P。,Brin,M。,Leevy,C。M。(1982)。Thiaminintheel-derly-relationtoalcoholismandtoneurologicaldegenerativedisease。American JournalofClinicalNutrition36,1067~1082

Leuschner,J。(1992)。Antinociceptivepropertiesofthiamin,pyridoxineand cyanocobalaminfollowingrepeatedoraladministrationtomice。Arzneimittel-Forschung42,114~115

Meador,K。,Loring,D。,Nichols,M。,Zamrini,E。,Rivner,M。,Posas,H。,Thompson,E。,Moore,E。(1993)。Preliminaryfindingofahighdosethiamin indementiaofAlzheimer’stype。JournalofGeriatricPsychiatryandNeurolo-gy,6:222~229

Mills,C。A。(1941)。Thiaminoverdosageandtoxicity。JournaloftheAmerican MedicalAssociation,116:2101

Molitor,H。(1942)。Vitaminsaspharmacologicalagents。FederationProceedings,1:309

OTC(2001)。OTCDirectory2001-2002,ProprietaryAssociationofGreatBritain

二、维生素B2(核黄素)

(一)分子结构

核黄素是一种水溶性的B族维生素,是由核糖和异咯嗪组成的呈平面结构的物质,在27°C的黑暗环境中对无机酸稳定,但在一般环境的酸性和碱性溶液中都能分解。

(二)膳食营养素参考摄入量(DRIs)

核黄素缺乏症的临床症状预防的最低需要量不足0.35mg?1000kcal。COMA推荐的RNI(推荐摄入量)为女性1.1mg/d,男性1.3mg/d(COMA,1991)。核黄素的转换与能量消耗有关,体力活动增加时核黄素的需要量也要适度增加,但还没有证实老年人的RNI低于年轻成人。美国成年男性和女性的RDA分别为1.3mg/d和1.1mg/d,孕妇增加到1.4mg/d,哺乳期增加到1.6mg/d。中国营养学会制定的成年男性和女性的RNI分别为1.4mg/d和1.2mg/d,孕妇和乳母为1.7mg/d。

(三)可能摄入量的估计

1.国外膳食调查结果

英国

总摄入量:

膳食 平均:1.8mg/d(摘自1986?87NDNS)

97.5百分位数:3.3mg/d

补充剂 最高100mg/d

估计每日最高摄入量:3.3+100=103mg/d

2.中国膳食调查结果

膳食中的摄入量(均数±标准差):(0.8±0.4)mg/d(资料来自第三次全国营养调查)

(四)毒理学研究

1.临床研究

(1)概述 没有证实核黄素对人体有毒副作用。高剂量时可发生无害性的尿液黄色加深。核黄素作为一种水溶性维生素,过多的摄入量可被排泄。但至少有1例关于口服含有核黄素的复合维生素B制剂可引起皮炎的报道。

现有的人群毒理学研究资料有限。曾有报告每天摄入核黄素400mg的剂量持续3个月以上后偶尔出现一些不能归因于核黄素的轻微副作用外,未见其他毒性症状。

(2)特别重要的临床研究 Zempleni等人(1996)评价了健康成人口服或静脉给予核黄素的药代动力学效应及其利用(黄素酶的合成)。在对照期测定了4名男性和5名女性血浆和尿液中核黄素浓度的周期性生理变化,每位受试者口服3种不同的核黄素剂量(20mg、40mg和60mg)并大剂量静脉注射核黄素(11.6mg),结果任一剂量水平都未见有副作用。

Schoenen等人(1998)在对28名偏头痛患者进行的预防性安慰剂对照研究中发现持续至少3个月给予高剂量(400mg/d)的核黄素可被很好地耐受。只有2例发生轻微的非特异性不良反应,而且这些不良反应也不能明确归因于核黄素。

2.动物实验

根据有限的资料,经口服或注射给予动物核黄素后产生的毒性很低。据报道,给予大鼠10000mg/d的急性口服剂量没有产生毒性作用。有些研究中经口途径给予实验动物(小鼠、大鼠、兔子、狗)剂量达到25mg/d的核黄素,长达22个月,结果未发现有明显的毒性。但这些实验资料仅对有限的终点指标进行了观察,就总体而言现有的核黄素对实验动物的毒性资料很有限。曾有报道核黄素对实验动物的生长发育毒性也很低。

3.致癌性与致畸性

(1)致癌性 未发现核黄素有致癌性,但核黄素缺乏可使某些肿瘤易于发生。一项对大鼠的研究表明,经口给予1.5mg?(kg·d)的核黄素为期22个月没有致癌性。但有报道(Florsheim,1994)提出核黄素可提高大鼠对电力辐射的反应性,而Pacernick等人(1975)发现口服核黄素对紫外线诱导的裸鼠皮肤肿瘤没有作用。口服核黄素也不影响纯合子或杂合子Gunn鼠对紫外线的敏感性。

(2)致畸性 Ames实验核黄素无致突变性。有报告未发现在umu或SOS色谱实验中有致突变性的证据。另一报告表明,核黄素对中国仓鼠肺多倍体细胞没有影响。其他实验中也未发现核黄素有遗传毒性。

(五)相互作用

核黄素缺乏会导致铁、锌、钙的吸收减少。

核黄素会减弱链霉素、红霉素、短杆菌素、碳霉素、四环素的抗菌活性,而对氯霉素、青霉素及新霉素没有干扰作用。

甲状腺激素、促肾上腺皮质激素、醛固酮可促进核黄素生成FMN及FAD,而酚噻嗪三环类抗抑郁药可能会抑制FAD的合成。

硼酸可加速核黄素的排泄。

预先给予丙磺舒会降低核黄素的肾脏清除率及胃肠道的吸收。

口服避孕药者可能需要额外补充维生素B2.

(六)摄入安全性的总评价

在一些人群研究中核黄素可被很好地耐受,没有不良反应的报告。核黄素对实验动物的毒性资料很少。大鼠急性经口给予核黄素后没有产生不良反应。小鼠、大鼠、兔和狗长期经口给予核黄素也没有产生明显的毒性。但还没有进行全面评估性研究。大多数研究只调查了数量非常有限的观察终点。

美国FNB未发现膳食或补充剂中过量核黄素导致不良反应的证据,即缺少制定LOAEL或NOAEL的依据。美国FNB对大量剂量递增的临床和科学研究进行综合分析后未找到制定UL的依据。

欧盟SCF同样未发现口服维生素B2的毒理学证据,因而也没有设定UL。

英国EVM根据美国FNB的临床试验资料得出结论,400mg/d这一剂量仅产生轻微的、不常见的、意义也不明确的副作用。由于该剂量水平的对照研究中的受试者数量较少,英国EVM将毒理学上的UF设置为默认值10,并将补充剂的GL定为40mg,总摄入量设置为43mg(因一般膳食中核黄素的摄入量为3.3mg或更少)。

(七)各国核黄素补充剂最高安全剂量的比较

美国CRN的ULS200mg

欧盟的ULS 尚未制定(截至2004年5月)

英国EVM关于补充剂的GL 40mg

中国营养素补充剂的最高剂量 20mg

参考文献

COMA。(1991)Committeeon MedicalAspectsofFoodand NutritionPolicy:Di-etaryReference ValuesforFood Energyand Nutrientsforthe UK。HMSO,London

FloersheimGL。(1994)Allopurinol,indomethacinandriboflavinenhanceradiation lethalityinmice。RadiationResearch,139:240~247

PacernickLJ,SoltaniK,LorinczAL(1975)Theinefficacyofriboflavinagainstul-traviolet-inducedcarcinogenesis。JournalofInvestigativeDermatology,65:547~548

Schoenen,J。,Jacquy,J。,Lenaerts,M。(1998)Effectivenessofhigh-doseri-boflavininmigraineprophylaxis。Arandomisedcontrolledtrial。Neurology,50:466~470

ZempleniJ,GallowayJR,McCormickDB。(1996)Pharmacokineticsoforallyand intravenouslyadministeredriboflavininhealthyhumans。AmericanJournalof ClinicalNutrition,63:54~66

三、烟酸(尼克酸和烟酰胺)

(一)分子结构

烟酸是尼克酸(吡啶-3-羧酸)和烟酰胺(尼克酰胺)及其辅酶形式的总称。烟酰胺是活性形式,其功能作为两种辅酶[即尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)和尼克 酰 胺 腺 嘌 呤 二 核 苷 酸 磷(NADP)]的组成成分。烟酸在动物组织 中 主 要 以 还 原 型 的 辅 酶(NADH?NADPH)形式存在。

(二)膳食营养素参考摄入量(DRIs)

在英国,烟酸的推荐摄入量(RNI)为6.6mgNE?1000kcal,相当于成年男性和女性分别为17mgNE/d和13mgNE/d(COMA,1991)。推荐乳母每日增加2.3mg烟酸。在正常情况下,对成人而言,膳食蛋白质中所含的色氨酸能转化成烟酸,以满足机体的需要。美国成年男性和女性的RDA分别为16mgNE/d和14mgNE/d,孕妇和乳母分别增加到18mgNE/d和17mgNE/d。中国提出的成年男性和女性的RNI分别为14mgNE/d和13mgNE/d,孕妇和乳母分别增至15mgNE/d和18mgNE/d。

(三)可能摄入量的估计

1.国外膳食调查结果

以下的烟酸膳食摄入量资料以烟酸当量(RE)为单位。由于色氨酸可在体内转化为烟酸,无法在调查资料中区分这两种形式的烟酸,因此将烟酸当量定义为膳食中的烟酸含量加上1?60的色氨酸含量。

英国

膳食 平均:34mg/d(1986?87NDNS)

97.5百分位数:57mg/d

补充剂 最高250mg/d(以烟酰胺的形式,如以尼克酸的形式为150mg/d)

烟酸当量的估计每日最高摄入量:57+250=307mg/d

2.中国膳食调查结果

膳食摄入量(均数±标准差):(15.7±6.4)mg/d(资料来自第三次全国营养调查)

(四)毒理学研究

1.临床研究

(1)概述 烟酸对人体的毒性报道主要见于用烟酸治疗高胆固醇血症的病人。许多不良反应都与剂量有关,并通常随剂量减少或停药而缓解。急性毒性症状包括面部潮红、皮肤瘙痒、恶心、呕吐和胃肠道不适。另外,长期摄入高剂量的尼克酸(通常为3000mg/d或更多)可出现黄疸、高血糖、腹痛、血胆红素浓度升高、碱性磷酸酶和转氨酶浓度升高。在少数病例中,烟酸治疗的副作用可表现为食欲不振、眼部症状、皮肤色素沉着过度及早期精神病。有报道认为长效缓释剂型比晶体剂型对肝脏的毒性更大。尽管证据很少但曾有长期高剂量(3000~9000mg)烟酰胺治疗后出现肝功能异常的病例报告。

Hoffer(1969)报道每日补充3000mg剂量的烟酰胺3~36个月后出现一系列不良反应,包括头痛、心口灼热、恶心、胃肠道功能紊乱和疲劳。但由于缺少对照组,无法提供更为详细的资料。其他补充剂实验[Vague等人(1987)、Mendola等人(1989)、Chase等人(1990)、Pozzilli等人(1995)和Lampeter等人(1998)]曾报道未发现摄入剂量达3000mg/d的烟酰胺有任何副作用。但给予最高剂量的研究主要是为了证实烟酰胺对Ⅰ型糖尿病患者的有利作用,但未知如何确定其他作用。有报道称每天摄入50mg及以上剂量的尼克酸补充剂可出现胃肠道反应和面部潮红。

据报道,给予烟酸缺乏的发展中国家的孕妇剂量高达2000mg/d的尼克酸后,未发现胎儿毒性的证据(Moghissi,1981)。

(2)特别重要的临床研究

① 尼克酸:Spies等人(1938)在一项没有对照组的研究中,一次性给予100名成年人空腹口服各剂量水平的尼克酸,其中,50mg剂量组和100mg剂量组中分别有5%和50%的受试者出现脸部潮红、炎症和瘙痒。200mg剂量组中的大多数受试者出现脸部潮红,500mg剂量组中的所有受试者出现不同程度的脸部潮红。通过对皮肤温度的研究发现,温度升高最明显的是耳部和颈部,其次是躯干,四肢所受影响最小。

Sebrell和Butler(1938)在一项没有对照组的研究中,由6名受试者组成的各剂量组分别给予剂量为10、30和50mg/d的尼克酸共3个月,这些受试者都食用相同的膳食。各组分别有0、2和4个人出现间歇性面部潮红。作者提出个体间的差异较大,但无法用体重来解释。

冠心病药物计划(1975)旨在研究尼克酸在降低冠心病患者继发性心肌梗死发病率的可能作用。研究证实直接的有利作用很少,而毒性较多。每日服用3000mg尼克酸至少5年的1119名病人中有1?3~1?2的人血清肝酶浓度升高。用尼克酸治疗的患者中出现血尿酸浓度升高(占治疗人数的44%)和急性痛风性关节炎发病率升高(占治疗人数的6.4%)。副作用可表现为面部潮红、瘙痒、皮疹等皮肤病症状,这与其他报道相一致。用尼克酸治疗者的其他主诉还包括胃肠道和尿道症状。

Knopp等人(1985)在一项以71名患者为对象的研究中,比较了常规尼克酸(37人)和缓释型尼克酸(34人)的作用,治疗期6个月,受试者服用的初始剂量为1500mg/d,从第2个月起剂量增加到3000mg/d。但由于服用缓释型药物的人群发生副作用的频率较高,故该人群的摄入量降低到2000mg/d。与服用常规剂型尼克酸的人相比,服用缓释型尼克酸的人患胃肠道疾病的可能性明显增高。两种治疗组都出现了皮肤病的症状。

Fraunfelder等人(1995)的一项回顾性调查中,102名用尼克酸(3000~8000mg/d)治疗高脂血症的病人比服用其他降脂药的病人更易发生视觉模糊(26%)、干眼症(20%)、眼睑水肿(10%)和黄斑水肿(2%)。如果停止治疗,这些眼部症状都是可以消退的,并且作者报道副作用的严重性与剂量有关。已证实有一病人的服用剂量从3000mg/d降低到1500mg/d后,其视觉症状得到改善。

② 烟酰胺:在Vague等人(1987)的双盲试验中,给予16名Ⅰ型糖尿病患者服用剂量为3000mg/d的烟酰胺或安慰剂,6个月后未发现任何不良作用。治疗组的平均年龄为22.1岁,安慰剂组的平均年龄为24.8岁。没有发现任何不良反应。

在Mendola等人(1989)的单盲试验中,给予20名最近被诊断为Ⅰ型糖尿病的患者服用剂量为1000mg/d的烟酰胺或安慰剂,为期45d。治疗组中受试者的平均年龄为18.3岁,安慰剂组的平均年龄为15.5岁。未发现这些患者的生理、生化和血液学指标有任何不良反应的变化。

Pozzilli等人(1995)在Mendola试验的基础上继续进行了一项双盲试验,给予56名年龄在5~35岁、最近确诊的Ⅰ型糖尿病患者服用烟酰胺[25mg?(kg·d)]或安慰剂达12个月。研究对象包括肝肾功能在内的各项生化检查结果都是正常的,且不论是治疗组还是安慰剂组的患者都未发现任何不良作用。

在Chase等人(1990)的双盲试验中,给予35名年龄在6~18岁、最近被诊断为Ⅰ型糖尿病的患者每天服用烟酰胺,剂量为患者的年龄×100mg,最高剂量达1500mg/d,为期12个月。认为使用烟酰胺没有任何明显的副作用,但尚不清楚有关副作用的信息是如何确定的。

Lampeter等人(1998)在德国烟酰胺干预研究(DENIS)中评价了高剂量的烟酰胺对Ⅰ型糖尿病高危儿童的临床功效。55名儿童被随机分成两组,分别服用安慰剂和烟酰胺补充剂(1200mg/d),服用时间最长为3.8年,平均治疗时间为2.1年。假定被研究的儿童的身高体重都比较平均,则服用烟酰胺补充剂的受试者烟酰胺(包括膳食中的烟酰胺)的估计摄入总量为1260mg/d或42mg?(kg·d)。两组受试者在观察期中糖尿病的发病率都是相同的。所有生化和血液学指标(丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶、胆红素、红细胞沉降率、γ-谷氨酰转移酶、尿素、尿酸、肌酐和乳酸脱氢酶)都在正常范围内。

2.动物实验

关于动物摄入尼克酸的毒理学研究资料很少。经口给予剂量为2000mg/d的尼克酸不足20d,狗可出现急性反应,表现为体重下降、粪便带血、致死性惊厥,并伴有胃肠道和中枢神经系统的改变。经口给予较低剂量(1000mg/d)的尼克酸8周后,狗的体重增加,健康状况良好,尿中发现有微量尿蛋白和尿糖。

已表明经口给予大鼠烟酰胺可导致生长迟缓,这一方面可能是由于口味差减少了饲料和水的摄入量,另一方面可能是由于蛋氨酸的缺乏(在烟酰胺甲基化生成代谢产物的过程中蛋氨酸被消耗)。长期用含1%烟酰胺的饲料喂养大鼠可抑制其生长。

3.致癌性与致畸性

(1)致癌性 还没有尼克酸致癌性的资料。烟酰胺最严重的副作用可能是诱导胰岛素依赖型糖尿病(IDDM)患者胰腺癌的发生。对小鼠的终身研究中,单独服用烟酰胺无致癌性。但与链脲菌素联用后,烟酰胺可导致大鼠的胰岛细胞肿瘤。其致瘤性可能是由于DNA的损伤程度与DNA修复的抑制水平之间不平衡所造成的。

(2)致畸性 目前还没有关于尼克酸或烟酰胺致畸性的资料。

(五)相互作用

长期服用异烟肼治疗肺结核可通过与磷酸吡哆醛的竞争导致烟酸缺乏症,这是由于磷酸吡哆醛是色氨酸转变为烟酸所必需的辅因子。因此如服用抗结核药异烟肼,可能需要额外补充烟酸。

除遵医嘱外,如服用降胆固醇药或过量饮酒,不要服用烟酸。

除遵医嘱外,如服用抗惊厥药(如卡马西平、扑痫酮),不要服用烟酰胺。

尼克酸可引起血管扩张,表现为皮肤潮红,并可加重神经节阻滞剂的扩血管作用。现在临床上已很少用神经节阻滞剂来降血压。

(六)摄入安全性的总评价

1.尼克酸

人群服用大剂量的尼克酸可引起许多不良反应。这些症状是在用尼克酸治疗高胆固醇血症的过程中被发现的。已报道的副作用包括面部潮红、皮肤瘙痒、恶心、呕吐和胃肠道功能紊乱。这些作用与剂量有关,停药后即可恢复正常。

有报道称长期口服更高剂量的尼克酸可出现肝功能紊乱,出现的症状包括肝酶升高、胆红素水平升高和黄疸等。其他已报道的副作用有高血糖症以及眼部症状如视觉模糊和黄斑囊性水肿。没有相关动物资料的报道,尚不清楚尼克酸诱导的毒副作用机制。

2.烟酰胺

现有的关于烟酰胺安全性的资料更少。在对Ⅰ型糖尿病患者的研究中指出剂量达3000mg/d的烟酰胺不产生副作用,但这些研究的调查人数少,且尚不清楚在给予最高剂量的研究中副作用是如何确定的。由于研究是在糖尿病患者或糖尿病高危人群中进行的,因此尚不清楚该结果对于一般人群的适用性。相关的动物资料尚未被证实。

美国FNB认为足够剂量水平的尼克酸(而不是烟酰胺)可引起血管扩张和皮肤潮红。但FNB根据尼克酸引起皮肤潮红的剂量确定了LOAEL,同时选定了一个UF,并将推导得到的UL同时应用于尼克酸和烟酰胺。FNB暗示潮红反应是一种“危险”,因而根据这一反应设定UL主要是因为该反应的不适性而并非有证据表明其确实有害。FNB根据Sibrell和Butler(1938)以及Spies等人(1938)的临床研究将LOAEL定为50mg。由于潮红这一症状轻微且持续时间短暂,FNB将UF定为1.5,因而得到的UL为35mg。

欧盟SCF认为剂量大于500mg的尼克酸产生的毒作用方式更加严重,但根据FNB所引用研究中的潮红反应将LOAEL定为30mg。欧盟SCF选择的UF为3,因此得到尼克酸的UL为10mg。欧盟SCF证实烟酰胺的UL为900mg。

英国EVM的结论是“还没有足够的人群或动物研究资料来制定尼克酸的安全上限值”。英国EVM根据UL的方法学,设定了尼克酸的GL。将LOAEL设为50mg(与FNB一致),UF定为3(与欧盟SCF一致),英国EVM最后得到尼克酸的GL为17mg。同欧盟SCF一样,英国EVM直接根据尼克酸的安全剂量设定了烟酰胺的安全剂量。已经证实在25mg?kg和42mg?kg这两个摄入水平都没有不良反应,但考虑到人数较少将UF定为3,推导得到60kg成人尼克酸补充剂的GL为500mg/d。假定来自于膳食中的摄入量不超过57mg,英国将总摄入量的GL定为560mg。

美国FNB制定的烟酸摄入量的安全范围。

(七)各国烟酸补充剂最高安全剂量的比较

各国尼克酸补充剂最高安全剂量的比较

美国CRN的ULS(快速释放)500mg(根据对肝脏的作用)

美国CRN的ULS(缓慢释放)250mg(根据对肝脏的作用)

欧盟的最高补充剂量 尚未制定(截至2004年5月)

英国EVM关于补充剂的GL 17mg(根据潮红作用)

中国营养素补充剂的最高剂量 15mg

各国烟酰胺补充剂最高安全剂量的比较

美国CRN的ULS1500mg

欧盟的最高补充剂量 尚未制定(截至2004年5月)

英国EVM关于补充剂的GL 500mg(总量为560mg)

中国营养素补充剂的最高剂量 50mg

参考文献

ChaseHP,Butler-SimonN,GargS,McDuffieM,HoopsSLandO’BrienD。(1990)AtrialofnicotinamideinnewlydiagnosedpatientswithType1(insul-in-dependent)diabetesmellitus。Diabetologia,33:444~446

COMA(1991)。DietaryReferenceValuesforFoodEnergyandNutrientsforthe UnitedKingdom。ReportofthePanelonDietaryReferenceValues,Committee on MedicalAspectsofFoodandNutritionPolicy。HMSO,London

CoronaryDrugProjectResearch Group。(1975)Clofibrateandniacinincoronary heartdisease。JournaloftheAmericanMedicalAssociation,231:360~81

DiPalmaJR,ThayerWS。(1991)Useofniacinasadrug。AnnuRevNutr,11:169~187

FraunfelderFW。,Fraunfelder,F。T。,Illingworth,D。R。(1995)Adverseocular effectsassociated withniacintherapy。BritishJournalofOphthalmology,79:54~56

HofferA。(1969)Safety,sideeffectsandrelativenicotinicacidandnicotinamide。 Schizophrenia,1:78~87

KnoppRH。,GinsbergJ,AlbersJJ。(1985)Contrastingeffectsofunmodifiedand time-releaseformsofniacinonlipoproteinsinhyperlipidemicsubjects:cluesto mechanismofactionofniacin。Metabolism,34:642~650

Lampeter,E。F。,Klinghammer,A。,Scherbaum,W。A。,Heinze,E。,Haastert,B。,Giani,G。,Kolb,H。(1998)TheDeutscheNicotinamideInterventionStudy:anattempttopreventTypeIdiabetes。Diabetes,47:980~984

Mendola,G。,Casamitjana,R。andGomis,R。(1989)Effectofnicotinamidether-apyuponB-cellfunctioninnewlydiagnosedType1(insulin-dependent)dia-beticpatients。Diabetologia,32:160~162

Moghissi,K。S。(1981)Risksandbenefitsofnutritionalsupplementsduringpreg-nancy。ObstetricsandGynecology,58:68~78

PozzilliP,VisalliN,SignoreA,BaroniMG,BuzzettiR。,Cavallo MG,Boccuni ML,FavaD,GragnoliC,AndreaniD,LucentiniL,MatteoliMC,CrinoA,CicconettiCA。,TeodonioC,PaciF。AmorettiR。,PisanoL。,Pennafina MG,SantopadreG,MarozziG,MultariG,SuppaMA,CaqmpeaL,DeMattiaGC,CassoneFaldettaM,MariettiG,PerroneF,GrecoAV,GhirlandaG。(1995)Doubleblindtrialofnicotinamideinrecent-onsetIDDM(theIMDIAB III study)。Diabetologia,38:848~852

RaderJI,CavertRJ,HathcockJN。(1992)Hepatictoxicityofunmodifiedand time-releasepreparationsofniacin。AmJMed,92:77~81

SebrellWH。andButlerRE。(1938)Areactiontotheoraladministrationofnico-tinicacid。JournaloftheAmericanMedicalAssociation,111:2286~2287

SpiesTD,Bean WB,StoneRE。(1938)Thetreatmentofsubclinicalandclassic pellagra。Useofnicotinicacid,nicotinicacidamideandsodiumnicotinate,with specialreferencetothevasodilatoractionandtheeffecton mentalsymptoms。 JournaloftheAmericanMedicalAssociation,111:584~592

Vague,P。,Vialettes,B。,Lassmann-Vague,V。,and Vallo,J。J。(1987)Nicotinamidemayextendremissionphaseininsulindependentdiabetes。Lancet,1:619~620

四、维生素B6(吡哆醇)

(一)分子结构

吡哆醇是一种水溶性维生素,其基本化学结构为3-甲基-3-羟基-5甲基吡啶。通常在食物中有3种存在形式即吡哆醇、吡哆醛和吡哆胺。吡哆醇具有光敏性,接触光线后会逐渐分解。

(二)膳食营养素参考摄入量(DRIs)

吡哆醇的推荐摄入量是根据蛋白质的摄入量制定的。英国将成人的RNI定为15μg?g蛋白质,这相当于男性和女性的摄入量分别约为1.4mg/d和1.2mg/d。美国成年男性和女性的RDA分别为1.3~1.7mg/d和1.3~1.5mg/d,孕妇和乳母分别为1.9mg/d和2.0mg/d。美国提出的UL为100mg/d。中国营养学会2000年提出的成人RNI为1.2mg/d,孕妇和乳母增加到1.9mg/d。孕妇、乳母和老人体内的维生素B6水平较低,可通过高蛋白饮食增加维生素B6的摄入量。

(三)相互作用

吡哆醇在人体内发挥生理学功能还需要核黄素、锌和镁的参与。

吡哆醇能催化ALA-合成酶,促进亚铁血红素及血红蛋白的形成。吡哆醇是卟胆原合成时必不可缺的ALA-合成酶的辅酶,因此吡哆醇参与血红素的合成。吡哆醇缺乏会导致血红蛋白合成减少、铁代谢紊乱及铁粒幼细胞贫血。

吡哆醇补充剂可降低左旋多巴(一种用于治疗帕金森氏病的天然氨基酸)的治疗效果,除医嘱外,如服用左旋多巴治疗帕金森氏病时,每日服用吡哆醇不超过6mg。

吡哆醇还与其他一些药物如异烟肼、苯妥英钠、茶碱及苯巴比妥等发生交互作用,服用上述药物时可能需要额外补充吡哆醇,但只是推荐摄入量水平,高剂量吡哆醇可能会干扰这些药物的作用。

口服避孕药的妇女对吡哆醇的需要量可能增加。

(四)毒理学研究

1.临床研究

(1)概述 据报道长期使用吡哆醇(一般剂量超过200mg/d)可导致感觉异常、嗜睡及血清叶酸浓度降低。大剂量的吡哆醇(通常指超过2000mg/d)可导致神经损害,症状包括手足麻刺感(感觉异常)、步态踉跄、口周麻木、特征性的袜套样感觉缺失及肌肉协调功能丧失。吡哆醇的持续使用时间和剂量一样重要,低剂量的吡哆醇(500mg/d或更少)使用几个月或几年也会产生神经病变。大多数情况下(并非所有病例)这种损害一般是可逆的。大剂量使用吡哆醇(150mg/d或更多)时还会出现夜间休息不良、多梦、光过敏及痤疮样皮疹。

许多吡哆醇补充剂的人群试验研究了吡哆醇对腕管综合征、经前综合征、妊娠反应及高同型半胱氨酸血症等疾病的影响。大多数实验没有设立安慰剂对照,而且对副反应没有进行研究或没有具体报道。

(2)特别重要的临床研究 用于评定吡哆醇危险度的人群研究很多。但由于是回顾性调查、观察终点未经标准化以及随访不完全,因此大多数现有的人群资料都无法令人满意。其他明显的缺陷还包括实验中没有适当的对照组(即未接受吡哆醇治疗的类似病人),而且通常采用观察法在小规模人群中进行,治疗的持续时间太短(18ng?mL。103名出现症状的女性服用吡哆醇的平均剂量为(117±92)mg持续时间为(2.9±1.9)年,而且70%的个体血浆水平>;34ng?mL这一最高可测限。相反,没有报告症状者吡哆醇的平均摄入量为(116±66)mg持续(1.6±2.1)年,其中55%的个体血浆水平>;34mg?mL。两组治疗持续时间之间的差异有显著的统计学意义(p<;0.01)。尽管这项研究证实了治疗的持续时间及血浆维生素水平在研究中的可用性,但在危险度评定方面仍有局限性。缺少对照组以及由于将问题集中于这些患者的症状而导致可能产生的偏倚,影响了这些数据的质量。需要指出的是在其他研究中未有高剂量组出现肌无力的报道。

Mitwalli(1984)给予22位高草酸尿症继发肾结石的男性患者剂量为(250~500mg/d)吡哆醇持续8个月到6年(平均2.3年)。对其中7人进行了神经传导研究。未有神经系统并发症的报道。由于参与实验的病人的人数少,限制了该研究结果对于危险度评定的价值。

Hawkins(1986)80名医师用安定类药物(酚噻嗪类及氟哌啶类)及高剂量的多种维生素制剂治疗总共58139名精神分裂症患者,有些病例甚至持续了多年,其迟发性运动障碍的发病率比预期的要低。维生素疗法包括每日3次1000mg剂量的维生素C、200mg的吡哆醇、200IU的维生素E以及1000mg的烟酸或者烟酰胺。这组数据的应用价值有限,原因包括:没有详细的描述,结果没有在权威杂志上发表,没有检查受试者的依从性(这是以精神分裂症患者为研究对象的一个缺陷),主要的观察终点(迟发性运动障碍)与神经损害无关,很难在精神分裂症患者中发现轻微的与吡哆醇相关的症状,神经阻滞剂及高剂量的其他维生素可能掩盖了吡哆醇的作用。因此,这项研究对危险度评定的价值有限。

综上报道,在最低剂量(50mg/d)出现神经损害的研究是Dalton(1987)进行的,这项调查也在很多方面存在缺陷。比如,缺乏对照组;由于患者的症状是通过询问得到的,可能存在报告偏倚。但这项研究的优势在于测定了维生素的血浆浓度。血浆吡哆醇浓度较高的女性,长时间服用后常常出现临床症状,由于缺乏更有质量的数据来明确吡哆醇的安全性,因此不能不考虑这项调查。Brush(1988)、Parry和Bredesen(1985)报告了在200mg/d和500mg/d这两个剂量出现神经损害,后一项调查的服用期持续了几年。但参与实验的病人人数少,提供的数据也少。其他有关低剂量吡哆醇作用的研究(如DelTredici等人,1985;Bernstein和Lob-itz,1988;Bernstein和Dinesen,1993)在某种程度上做的更好,但没有足够的服用持续时间。例如,在Bernstein和Lobitz(1988)实验中,给予患者150mg/d剂量的吡哆醇为期6个月,在Del Tredici(1985)实验中,患者接受150和300mg/d的剂量只持续了2~4个月,在Bernstein和Dinesen(1993)实验中200mg/d这一剂量只持续了3个月。这些研究没有设安慰剂对照组,而且参与实验的病人人数少、持续时间短,即使是高剂量也不足以产生症状。因而虽然这些研究出现阴性结果,但也不一定与Dalton(1987)的数据相矛盾。

2.动物实验

(1)概述 不同种属的动物给予从50mg?(kg·d)到7000mg?(kg d)不等的剂量的吡哆醇,出现神经损害症状的时间间隔也不同,不同种属之间存在明显差异。动物实验未发现对胎儿发育有影响。腹腔内注射剂量为250和500mg?(kg d)的吡哆醇可导致大鼠的睾丸发生组织学改变(较低剂量时是可逆的)。雌性大鼠腹腔内注射50mg?(kg d)剂量可抑制催乳素的释放。

(2)特别重要的动物实验 许多现有的动物实验是以注射的方式给予吡哆醇的。同时在对狗和大鼠的实验中都证实了吡哆醇的毒性是呈剂量和时间依赖性的。这些数据不能直接与那些经口服途径给药得到的数据相比较。与大多数人群资料不同的是,以下描述的动物实验都是有对照组的,因而这些实验在危险度评定方面有一定的价值。但参与实验的动物数量少,尤其是以狗为对象的实验。

Phillips等人(1978)经口给予3组雌性小猎犬(每组4只对照,5只受试)一种盐酸吡哆醇胶囊[分别含0、50和200mg?(kg d)的盐酸吡哆醇]持续100~112d。高剂量组中的4只在治疗45d后出现共济失调、失去平衡的症状,第5只在75d后出现临床症状。在50mg?(kg d)剂量组未发现这些症状,但组织学检查发现其双侧背根神经髓磷脂的丢失。

Hoover等人(1981)的实验共有3只成年猎犬(第4只作为对照),经口给予吡哆醇胶囊,第1周剂量为5mg?(kg d),第2周为100mg?(kg·d),从第15d开始到实验的第100d的剂量为150mg?(kg d)。每只给予吡哆醇的狗都出现了以本体感受缺陷为特征的神经疾病,其中2只狗是在约第4周时出现症状的,第3只是在第8周时出现症状。这些狗的四肢出现痉挛、大腿移动辨距障碍以及大腿明显缺乏运动觉及位置觉。组织学超微结构上的特征表现为轴突变性、缺失,髓鞘萎陷,髓磷脂变性和丢失以及星形细胞的瘢痕化。

Krinke等人(1980)在均衡饮食的基础上给予6只猎犬剂量为300mg?(kg d)的盐酸吡哆醇胶囊。还有另外2只狗作为对照。9d内试验组动物出现了摇摆步态,最终不能行走,但没有发现明显的肌无力。形态学检查显示脊髓根神经节及三叉神经节有弥漫性的神经元变性。周围神经、脊髓背根及下行的三叉神经脊束支有明显的感觉神经纤维变性。

3.致癌性与致畸性

尚无已发表的关于吡哆醇致癌性及致畸性的资料。

(五)可能摄入量的估计

1.国外膳食调查结果

英国

总摄入量:

膳食 平均:2.0mg/d

97.5百分位数:3.9mg/d(NDNS,1986?87)

补充剂 最高100mg/d

估计每日最高摄入量:3.9+100=104mg/d

2.中国膳食调查结果

尚无资料。

(六)摄入安全性的总评价

吡哆醇的主要副作用是神经损害,这已在人群及实验动物中得到证实。高剂量或长期服用后出现症状,症状一般在停药后不再出现,但一些高剂量的病例出现不可逆性症状。进行性感觉性共济失调最初表现为步态不稳、足部麻木出现,然后是手麻木,接着是四肢远端位置觉及震动觉的严重损害。对触觉、温度觉以及痛觉的影响较少。

动物研究资料也表明吡哆醇有神经毒性,但存在一些明显的种属差异。低至50mg?(kg·d)的剂量已开始出现髓磷脂丢失,并且还发现了一些更细微的影响如惊恐反应的变化等。动物资料也提示服用的持续时间对吡哆醇的作用非常重要。

美国FNB根据临床资料[Bernstein和Lobitz(1988);Del Tredici等人(1985)]确定NOAEL为200mg,但认为Dalton和Dalton(1987)的资料可信度较差,无法作为制定UL的依据。故将人群NOAEL定为200mg,UF定为2,得到UL为100mg。

欧盟SCF根据Dalton和Dalton(1987)的资料制定了吡哆醇的UL。由于在Dalton和Dalton的研究中,出现不良反应的吡哆醇摄入量的均数为117mg,中位数<;100mg,故将LOAEL定为100mg。将UF定为4(其中的系数2用于解释长期摄入,另一个系数2用于解释数据库的差异)。因此,欧盟SCF推算得到的UL为25mg。

英国EV认为现有的人群资料尚不充分,故根据对狗的研究得到的50mg?(kg d)这一LOAEL值,并将UF定为300(其中的系数3用于从LOAEL向NOAEL的推导,系数10用于推导种属间的差异,另一个系数10用于解释人群敏感度的差异),最终得到的最高安全摄入量(SUL)为10mg/d(按成人体重60kg计算)。总之,上述三份政府报告选择了不同的关键资料来作为危险度评定的依据,同样所选择的不确定系数也不同。因此得到的吡哆醇安全量也不同:美国FNB为100mg,欧盟SCF为25mg,英国EVM为10mg。

美国FNB制定的吡哆醇摄入量的安全范围。

(七)各国吡哆醇补充剂最高安全剂量的比较

美国CRN的ULS100mg

欧盟的最高补充剂量 尚未制定(截至2004年5月)

英国EVM关于补充剂的GL 10mg(根据动物数据推导得到)

中国营养素补充剂的最高剂量 10mg

参考文献

BergerAR,SchaumburgHH,SchroederC,ApfelS,ReynoldsR。(1992)Dosere-sponse,coasting,anddifferentialfibrevulnerabilityinhumantoxicneuropathy:a prospectivestudyofpyridoxineneurotoxicity。Neurology,42:1367~1370

Bernstein,A。L。,Lobitz,C。S。(1988)Aclinicalandelectrophysiologicstudyof thetreatmentofpainfuldiabeticneuropathieswithpyridoxine。In:LeklemJE,Reynolds,RD(eds)ClinicalandPhysiologicalApplicationsofVitaminB6. AlanRLiss,New York,415~423

BernsteinAL,DinesenJS。(1993)EffectofpharmacologicdosesofvitaminB6on carpaltunnelsyndrome,electroencephalographicresults,andpain。Journalof theAmericanCollegeofNutrition12:73~76

Brush MG。(1988)VitaminB6treatmentofpremenstrualsyndrome。Clinicaland PhysiologicalApplicationsofB6.AlanR。Liss,NewYork,363~379

Brush MG,BennettT,HansenK。(1988)Pyridoxineinthetreatmentofpremen-strualyndrome:aretrospectivestudyin630patients。BritishJournalofClinical Practice,41:448~452

Dalton,K。,Dalton,M。J。T。(1987)Characteristicsofpyridoxineoverdoseneu-ropathysyndrome。ActaNeurologicaScandinavica,76:8~11

DelTrediciAM,BernsteinAL,ChinnK。(1985)Carpaltunnelsyndromeandvi-taminB6therapy。In:ReynoldsRD,LeklemJE(eds)VitaminB6:itsRolein HealthandDisease。AlanRLiss,New York,459~462

HawkinsDR。(1986)Thepreventionoftarditivedyskinesiawithhighdosagevita-mins:astudyof58000patients。JournalofOrthomolecularMedicine,1(1):24~29

Hoover,D。M。,Carlton,W。W。,Henrikson,C。K。(1981)Ultrastructurallesions ofpyridoxinetoxicityinbeaglesdogs。VeterinaryPathology,18:769~777

Krinke,G。,Schaumberg,H。H。,Spencer,P。S。,Suter,J。,Thomann,P。Hess,R。(1980)Pyridoxinemegavitaminosisproducesdegenerationofperipheralsenso-ryneurons(sensoryneuropathy)inthedog。Neurotoxicit,2:13~24

Mitwalli,A。,Blair,G。,Oreopoulos,D。G。(1984)Safetyofintermediatedoses ofpyridoxine。CanadianMedicalAssociationJournal,131:14

Molimard,R。,Marillaud,A。,Paille,A。,Le Devehat,C。,Lemoine,A。and Dougny,M。(1980)。Impairmentofmemorizationbyhighdosesofpyridoxine inman。Biomedicine,32:88~92

ParryGJ,BredesenDE。(1985)Sensoryneuropathywithlowdosepyridoxine。 Neurology,35:1466~1468

PhillipsWEJ,MillsJHI,CharbonneauSM,TryphonasL,HatinaGV,Zawidska Z,BryceFR。,MunroIC。(1978)Subacutetoxicityofpyridoxinehydrochloride inthebeagledog。ToxicologyandAppliedPharmacology,44:323~333

SchaumburgH,KaplanJ,WindebankA,VickN,RamusS,PleasureD,Brown M。J。(1983)Sensoryneuropathyfrompyridoxineabuse。NewEnglandJournal ofMedicine,309(8):445~448

五、维生素B12(钴胺素)

(一)分子结构

钴胺素是一种水溶性维生素,也是类咕啉家族的成员,类咕啉含有一个由四吡咯环状结构组成的咕啉。四吡咯环状核的中心含有一个可与甲基、脱氧腺苷、羟基和氰基结合的钴离子。

(二)膳食营养素参考摄入量(DRIs)

英国钴胺素的成人RNI为0.0015mg/d(COMA,1991)。孕期需要量并不增加,但建议哺乳期妇女增加0.0005mg/d。美国新修订的RNI成年男女均为2.4μg/d,孕妇和乳母分别为2.6μg/d和2.8μg/d。

我国提出的成人钴胺素的AI为2.4μg/d。孕妇和乳母分别增加到2.6和2.8μg/d。

(三)可能摄入量的估计

1.国外膳食调查结果

英国

总摄入量:

膳食 平均:0.0062mg/d

97.5百分位数:0.020mg/d(1986?7NDNS)

补充剂 最高为3.0mg/d

估计每日最高摄入量:0.020+3.0=3.020mg/d

2.中国膳食调查结果

尚无资料。

(四)毒理学研究

1.临床研究

(1)概述 有一些摄入钴胺素后产生不良作用的病例报告,其中有些摄入的是补充剂,有些是摄入了含有氰钴胺素的酵母。有5例发生过敏反应的报告,其中有3例是复发症状,这些人以前曾通过胃肠外途径接触过钴胺素。另一病例是类似于玫瑰痤疮的皮疹。这些研究中钴胺素的接触剂量不明。

在一项一次性口服氰钴胺素(最高达到100mg)的实验中,没有发现不良作用,但其中只有3人给予了很高的氰钴胺素剂量。

尽管在研究钴胺素对恶性贫血影响的口服试验中未发现明显的不良作用,但由于在这种疾病状态下钴胺素的吸收减少,这一研究结果无法推广到一般人群。此外还研究了口服高剂量的氰钴胺素对健康育龄妇女的血浆同型半胱氨酸浓度以及季节性情感障碍患者的影响。任何一项研究都未发现与治疗相关的不良作用,其中包括每日摄入4.5mg氰钴胺素14d,每日摄入2.0mg氰钴胺素1年,和每日摄入1.0mg氰钴胺素几年。口服以羟基钴胺素形式存在的钴胺素后的资料较少。每天给予0.3mg的剂量12d后未有不良反应的报道。在一项由125人参与的对照研究中,每天给予6.0mg甲基钴胺素12d后未有不良反应的报道。

给予精子减少病人6mg/d和12mg/d甲基钴胺素(假定通过口服途径)16周后,16人和23人中分别有1人发生不良反应。但该研究未设立对照组。

(2)特别重要的临床研究 Waife等人(1963)在以27名恶性贫血患者为对象的干预研究中,每日给予0.3mg羟基钴胺素1年后未有不良反应的报道。

Berlin等人(1968)在一项对64名恶性贫血以及其他类型钴胺素缺乏症患者进行的长期临床干预试验中,每天口服剂量为从0.5mg到1.0mg不等的氰钴胺素(不含内因子)10~70个月(42个病人的治疗期长于4年)后,未有氰钴胺素引起不良反应的报道。

Juhlin和Olsson(1997)100名患有白斑病的患者每天两次口服叶酸5mg和氰钴胺素1.0mg,12个月后未有不良反应的报道。但在开始后的1~2个月和3~6个月,100人中分别有27人和48人停止服用,但未说明停服理由。

Takahashi等人(1999)在一项评价甲基钴胺素治疗睡眠障碍的作用的双盲研究中,分别给予病人治疗组6.0mg(n=21)和对照组0.03mg(n=27)甲基钴胺素8周。由于伦理学上的原因不允许设立安慰剂对照组,因此将低剂量组作为对照组。该研究中未有不良反应的报道。给药途径没有明确说明。8周后未收集到所有病人的完整资料(6.0mg/d剂量治疗组和0.03mg/d剂量对照组分别有2人和3人的资料缺失)。

2.动物实验

口服钴胺素对实验动物毒性的研究资料有限。发现腹腔内注射1.5mg?(kg d)以及皮下注射3.0mg?kg对小鼠有急性毒性(影响中枢神经系统、惊厥、心力衰竭和呼吸功能衰竭直到最终死亡)。但经口给予更高剂量(≥5g?kg)的氰钴胺素后,小鼠仍能耐受。尚无证据说明钴胺素对生育能力和出生后的发育产生不良作用。

3.致癌性和致畸性

没有证据提示钴胺素在体内外有致癌性或有致畸性。尽管资料并不一致,但有限的证据提示高剂量的钴胺素可能有促进肿瘤活性的作用。

(五)相互作用

同时口服抗坏血酸可破坏钴胺素。

补钾时,可能需要额外补充钴胺素。

过量饮酒以及有些药物可减少钴胺素的吸收。如服用减少胃酸的药物(例如H2阻滞剂雷尼替丁)、壁细胞(H+?K+)-ATP酶的特异性抑制剂(奥美拉唑)、抗痛风药(秋水仙素)、降糖药(二甲双胍)以及接受一氧化二氮麻醉者可能需要额外补充钴胺素。

有报道称类固醇药物(如强的松)可增加恶性贫血病人对钴胺素的吸收。同时给予氯霉素可对钴胺素的促红细胞作用产生拮抗。

(六)摄入安全性的总评价

钴胺素是一种水溶性维生素。在生理剂量水平(如食物中的含量)吸收量受限于内因子———壁受体系统的摄取能力(大约每餐吸收0.002mg)。在药用剂量水平,扩散是更为重要的吸收途径。当钴胺素的含量超出肝脏、血浆和其他组织的结合能力时,通过肾小球的滤过功能排出体外。

通常认为人体摄入钴胺素后的毒性很低。现有的大多数资料是可能与钴胺素相关的不良作用的病例报告以及主要用来研究其潜在有利作用的补充实验。后者通常采用以氰钴胺素和甲基钴胺素形式存在的钴胺素,并且有些研究没有明确说明是否有不良作用。

钴胺素的动物毒性数据库很有限。腹腔内和皮下的注射剂量分别为1.5和3.0mg?kg时对小鼠有急性毒性(影响中枢神经系统、惊厥、心力衰竭和呼吸功能衰竭直到最终死亡)。但经口给予更高剂量(≥5g?kg)的氰钴胺素后小鼠仍能耐受。

美国FNB得出结论“来自膳食或补充剂的过量钴胺素对健康人没有不良作用”。因而FNB的结论是没有发现设定UL的依据。

同样,欧盟SCF对钴胺素进行评价后得出结论,钴胺素没有明确的毒副作用,因而没有建立UL的依据。

英国EVM未发现钴胺素对人体毒副作用的证据,但皮下或腹腔注射剂量从1.5~3.0mg?(kg d)的钴胺素对小鼠产生急性毒性作用。该报告的结论是没有建立口服钴胺素SUL值的依据,但根据临床研究结果将2000μg这一剂量作为GL,并且其他资料显示该剂量没有不良作用。

(七)各国钴胺素补充剂最高安全剂量的比较

美国CRN的ULS1000μg

欧盟的最高补充剂量 尚未制定(截至2004年5月)

英国EVM关于补充剂的GL 1000μg

中国营养素补充剂的最高剂量 10μg

参考文献

BerlinH,BerlinR,BranteG。(1968)。Oraltreatmentofperniciousanemiawith highdosesofvitaminB12 withoutintrinsicfactor。ActaMedicaScandinavica,184:274~258

COMA(1991)。DietaryReferenceValuesforFoodEnergyandNutrientsforthe UnitedKingdom。ReportofthePanelonDietaryReferenceValues,Committee on MedicalAspectsofFoodandNutritionPolicy。HMSO,London

JuhlinL,Olsson M J。(1997)。Improvementofvitiligoafteroraltreatmentwith vitaminB12andfolicacidandtheimportanceofsunexposure。ActaDermatol-venereologica,77:460~462

TakahashiK。,OkawaM,MatsumotoM。,MishimaK。,YamaderaH,SasakiM,IshizukaY,YamadaK,HiguchiT,OkamotoN,FurutaH,NakagawaH,Ohta T,KurodaK,SugitaY,InoueY,UchimuraN,NagayamaH,MiikeT,Kamei K。(1999)。Double-blindtestontheefficacyofmethylcobalaminonsleepwake rhythmdisorders。PsychiatryandClinicaleurosciences,53:211~213

WaifeSO,JansenCJ,CrabtreeRE,GrinnanEL,FoutsPJ。(1963)。Oralvitamin B12withoutintrinsicfactorinthetreatmentofperniciousanemia。AnnalsofIn-ternalMedicine,58:810~817

六、生 物 素

(一)分子结构

D-生物素(生物素、辅酶R、维生素H)是一种水溶性维生素,它具有一个双环结构,一个环含脲基,另一个环为一个含硫的杂环带一个戊酸侧链。

(二)膳食营养素参考摄入量(DRIs)

由于资料不够充分,COMA无法制定生物素的膳食参考摄入量,但认为每日摄入量在0.01~0.20mg之间是安全且适宜的(COMA,1991)。美国FNB推荐的成年男、女和孕妇的AI均为30μg/d,乳母为35μg/d。中国营养学会提出成年人和孕妇的AI为30μg/d,乳母为35μg/d。

(三)可能摄入量的估计

1.国外膳食调查结果

英国

总摄入量:

膳食 平均:0.033mg/d(1986?7NDNS)

97.5百分位数:0.066mg/d

补充剂 最高为2mg/d

估计每日最高摄入量:0.066+2=2.066mg/d

2.中国膳食调查结果

尚无资料。

(四)毒理学研究

1.临床研究

(1)概述 非正式报告提出10mg/d这一剂量不会产生不良反应,而且有报道称每日服用剂量高达200mg也未出现毒性反应。尽管临床资料有限,但有研究报道9mg/d的剂量服用4年、10mg/d服用15d、4mg/d服用3周以及2.5mg/d服用6~15个月后,都未出现与生物素相关的副作用。

(2)特别重要的临床研究 Maebashi等人(1993)每日3次给予20名非胰岛素依赖性糖尿病患者(性别年龄不详)口服生物素(9mg,合用3g抗菌药,Miya-BM),时间最长为4年,在第24、30、36和48个月随访到的病人数分别为15、15、10和5人。该研究未设对照组。2个月内空腹血糖浓度迅速降至正常并在随后持续治疗中保持正常。血清胰岛素浓度没有明显变化。研究报道没有观察到临床症状的恶化以及不良作用。这项研究由于设计上不符合常规以及研究对象少,不能用于危险度的评定。

Velazquez等人(1995)在双盲安慰剂对照实验中,给予蛋白质缺乏的儿童(n=22)服用10mg/d的生物素15d。并测定了血浆生物素浓度和淋巴细胞羧化酶。未报道有任何不良作用。但这项研究不能用于说明生物素对于蛋白质摄入量正常的儿童的安全性。

2.动物实验

关于生物素对实验动物毒性方面的数据有限。大、小鼠经口或静脉给予生物素后产生的急性毒性很低。关于皮下注射高剂量的生物素是否对实验动物的生殖系统产生不良作用这一问题仍有争论。有报道称给予交配前的雌性Holzman大鼠注射生物素(50mg?kg)3周后,发情期出现与给予生物素相关的发情期紊乱、卵巢萎缩、胎儿胎盘生长抑制以及胎儿吸收增加,在对IbmROROf大鼠和ICR小鼠进行的类似研究中并未发现以上作用。这些研究不适用于口服剂量的危险度评定。

3.致癌性与致畸性

生物素无致癌性方面的资料。Ames试验结果呈阴性。但还没有进一步检测生物素致突变性的资料。

(五)相互作用

在某些组织中泛酸和生物素可以共用相同的载体介导的摄取机制,但目前尚不清楚这一相互作用的临床意义。

一些抗惊厥药和酒精可以抑制生物素在肠内的载体介导的转运。类固醇激素和某些抗惊厥药可以加速组织中生物素的分解代谢。饮酒者以及抗癫痫发作治疗时需要额外补充生物素。已发现过氧化物酶体增殖子可加速大鼠对生物素的分解代谢,但这一发现与人的相关性尚有疑问。

(六)摄入安全性的总评价

关于人群口服生物素的毒性资料相对很少。现有的数据都是来自非正式的病例报告以及旨在研究生物素有利作用的临床试验或补充剂研究。后者很少特别指出生物素是否存在不良作用。

关于生物素毒性的动物试验数据资料也非常有限,尤其是经口服途径。

美国FNB的结论是有关生物素不良反应的资料不足以进行危险度评定,无法推导出UL。

欧盟SCF也认为缺少支持危险度评定的资料,因而没有设定UL。

同样,英国EVM的结论也是人群和动物资料不足以制定SUL。由于在任一可观察到的剂量水平都未发现确切的毒性,英国EVM证实了在一项口服生物素剂量为9mg/d的临床试验中,没有发生不良反应。考虑到研究人数少,英国EVM将UF定为10,认为GL为0.9mg/d这一生物素的补充剂量应该是安全的。再加上膳食中的摄入量0.066mg,英国EVM将所有来源的摄入量定为0.966mg/d。

(七)各国生物素补充剂最高安全剂量的比较

美国CRN的ULS(OSL法)2500μg

欧盟的最高补充剂量 尚未制定(截至2004年5月)

英国EVM关于补充剂的GL 900μg

中国营养素补充剂的最高量 100μg

参考文献

COMA(1991)。DietaryReferenceValuesforFoodEnergyandNutrientsforthe UnitedKingdom。ReportofthePanelonDietaryReferenceValues,Committee on MedicalAspectsofFoodandNutritionPolicy。HMSO,London

MaebashiM,MakinoY,FurukawaY,OhinataK,KimuraS,SatoT。(1993)。 Therapeuticevaluationoftheeffectofbiotininhyperglycemiainpatientswith non-insulin-dependentdiabetesmellitus。JournalofClinicalBiochemistry andNutrition,14:211~218

VelazquezA,TeranM,BaezA,GutierriezJ,RodriguezR。(1995)。Biotinsup-plementationaffectslymphocytecarboxylasesandplasmabiotininsevereprote-inenergymalnutrition。AmericanJournalofClinicalNutrition,61:385~391

七、叶酸

(一)分子结构

叶酸盐一般是指含有蝶酰谷氨酸(PGA,叶酸)结构的各种衍生物,是常用的药物形式,也是叶酸类中最稳定的形式,由三个主要的亚基———蝶啶、p-氨基苯甲酸和谷氨酸组成。在本节中,依照国际纯应用化学协会和国际分子生物学协会(IUPAC-IUB)的顾问专家小组的指导意见,叶酸是指母体化合物蝶酰谷氨酸,而叶酸盐一般是指单个蝶酰谷氨酸盐或其混合物。

(二)膳食营养素参考摄入量(DRIs)

婴儿、1~3岁、4~6岁和7~10岁儿童的叶酸推荐摄入量(RNI)分别为0.05、0.07、0.10和0.15mg/d。成人和≥11岁儿童叶酸的RNI为0.200mg/d。考虑到妊娠期和哺乳期需要量的增加,叶酸推荐量分别增加0.10mg/d和0.06mg/d,即孕妇0.30mg/d,乳母0.26mg/d。COMA也推荐准备怀孕的妇女除了正常膳食叶酸盐的摄入外,还应每天补充0.40mg的叶酸,直到怀孕12周。建议神经管畸形(NTD)高危孕妇应每日额外增加5mg的剂量。美国FNB推荐的成年男女的RDA为0.4mg/d,孕妇为0.6mg/d,乳母为0.5mg/d。中国营养学会提出的一般成人的RNI为0.4mg/d,孕妇和乳母分别增加至0.6mg/d和0.5mg/d。

(三)可能摄入量的估计

1.国外膳食调查结果

英国

总摄入量:

膳食 平均:0.26mg/d

97.5百分位数:0.49mg/d(1986?87NDNS)

补充剂 在OTC中男性补充剂量达到0.50mg(OTC,2001)

在OTC中女性补充剂量达到0.80mg

估计每日最高摄入量:男性0.99mg/d

女性1.29mg/d

2.中国膳食调查结果

尚无资料。

(四)毒理学研究

1.临床研究

(1)概述 一般认为,即使以每日10~20mg剂量的叶酸来治疗疾病也是安全的。由于叶酸可逆转维生素B12缺乏导致的血象和症状,这一掩盖作用可导致与维生素B12缺乏有关的神经病变未能及时治疗而继续发展。一般来说,维生素B12缺乏最常见于老年人和吸收障碍者。不良作用可能发生于一些特定人群,如服用与叶酸代谢发生相互作用的药物的病人。

少数病例报告描述了口服叶酸治疗引起的过敏反应(通常剂量≥1mg/d)。一项短期、无对照组的补充剂试验报道给予健康志愿者高剂量的叶酸(15mg/d)1个月后出现了不良反应(精神改变、睡眠紊乱和胃肠道症状),但其他研究未观察到类似结果。

大量补充剂研究已经或正在评估叶酸在预防疾病方面的有效性(一般指预防高危人群中胎儿发生神经管畸形或心血管疾病)。许多试验表明,几周或几个月口服剂量为10mg/d的叶酸补充剂可能有益。很少有不良作用的报道,但大多数研究并未特别提到这个问题。

试验已表明围受孕期补充叶酸或含叶酸的多种维生素片,可明显降低胎儿神经管畸形的发病率。因此,为了预防胎儿神经管畸形的发生,COMA推荐育龄妇女除了日常膳食中叶酸的摄入外,还应每日补充0.4mg的叶酸。建议高危妇女的补充剂量应为该剂量的10倍。尽管迄今为止的人群试验不足以证实罕见的或轻微的不良反应,但一般认为对生殖或生长发育没有不良作用。

1992年匈牙利的一项大规模研究提示围受孕期补充多种维生素片(含0.8mg/d的叶酸)后胎儿神经管畸形的发病率降低,而自然流产明显增加。因此,已提出叶酸可能通过使已受影响的胎儿自然流产而预防神经管畸形。但最近以神经管畸形遗传倾向的大鼠为对象的研究并不支持这一理论,在这些体外研究中给予胚胎叶酸可使神经管正常发育而不促使流产的发生。

在两项对孕早期补充叶酸的研究中,报道了多胎的发生在统计上显著增加。该作用似乎仅限于双卵双胎,且其中一位作者提出的理论是:该作用是由于多胎妊娠的存活率增加了所导致的,而不是排卵增加了,因为多胎妊娠需要更多的微量营养素。

(2)特别重要的临床研究 Weissberg等人(1950)的无对照组研究以26名正常志愿者和22名患非恶性贫血患者为对象,探讨每日补充20mg叶酸6~12个月对神经系统的影响。治疗前,6名正常志愿者和7名贫血患者表现出的一些异常神经系统体征(但不是亚急性联合脊髓退行性变)在治疗过程中并未明显改变。在叶酸治疗中,4名对象(1名正常人和3名贫血患者)发生了中枢神经系统改变,但这些变化被认为与治疗无关。

Harvey等人(1950)在公开的非对照性研究中,给予40个无恶性贫血的健康受试者(13个受试者患有轻度低色素性贫血)口服叶酸补充剂(20mg/d为期3~12个月),没有出现脊髓或外周神经损伤的症状。

MRC维生素研究组(1991)在英国进行的多中心随机双盲的安慰剂对照试验中共有1817名有神经管畸形胎儿分娩史的妇女,她们被分配到以下4个补充剂组中的任一个:①叶酸4mg/d;②叶酸4mg/d+多种维生素片(每日维生素A4000IU,维生素D 400IU,维生素B1和维生素B2各1.5mg,维生素B61.0mg,维生素C40mg,烟酰胺15mg;③安慰剂;④多种维生素片(同②,但无叶酸)。治疗时间是从随机分组开始直到孕12周。统计分析显示,与未补充叶酸组(③和④组)相比,补充叶酸组(①和②组)患神经管畸形的相对危险性显著下降(RR=0.28;95%CI:0.12~0.71)。同时检测了叶酸对胎儿和母亲的可能产生的不良作用。得出的结论是:尽管本次研究发现罕见或轻微副作用的研究能力有限,但补充剂的有害作用还没有得到证实。参加试验的妇女报告的常见副作用(如不孕症、月经不调、孕吐、上呼吸道疾病)的发生率4组均接近。

2.动物实验

(1)概述 叶酸在实验动物中的毒理学研究资料有限,许多报告已提出啮齿类动物经胃肠外给予极高剂量(≥75mg?kg)的叶酸可引起肾毒性,另外,已表明直接注射高剂量的叶酸到大、小鼠的脑或脊髓液中,可引起癫痫发作。一项研究显示,大鼠给予大剂量的含叶酸的营养素补充剂后可减少戊四唑的使用剂量,而后者可诱发癫痫。

尽管已有研究表明补充叶酸后胎儿体内的叶酸水平升高,但单独经口给予叶酸补充剂通常对实验动物没有生殖或胚胎毒性作用。有研究小组报道在孕3周给予孕鼠叶酸含量约为2mg?(kg·d)的饲料后,与给予基础饲料的对照组相比,其体重减轻、头顶-尾骨长度变短,但并不确定该研究所用统计分析的可信程度。另外,据报道叶酸可加强某些药物(乙胺嘧啶、丙戊酸)以及锌缺乏所导致的胚胎毒性。

(2)特别重要的动物实验 在Chung(1993)对叶酸和抗疟药乙嘧啶(一种二氢叶酸还原酶抑制剂)之间协同作用的研究中,从孕7~17d,用灌胃法给予10只孕鼠抗疟药乙嘧啶和?或叶酸的混合物。单用叶酸治疗[50mg?(kg d)]对母亲和胎儿没有明显毒性。

3.致癌性与致畸性

相对于叶酸缺乏而言,有关叶酸补充剂试验的资料有限,叶酸补充剂对患自发性肿瘤或接触化学致癌物的动物可能有促进肿瘤发展的作用。这可能与叶酸促使细胞复制的作用有关。

体外和体内研究资料都表明叶酸无致畸性。

(五)相互作用

叶酸、维生素B6和维生素B12的代谢都与甲硫氨酸合成酶(需要维生素B12作为辅因子)有关。

一些学者已报道叶酸补充剂对锌的营养状况有负面影响。一些动物研究提示铁缺乏可引起叶酸的耗竭。叶酸补充剂可与许多药物(抗叶酸药、抗癫痫药物、抗菌药)发生相互干扰。

(六)摄入安全性的总评价

通常认为叶酸用于疾病的治疗是安全的。对特定人群可能有副作用,例如服用干扰叶酸代谢药物的患者。神经管畸形高危妇女的叶酸补充剂口服剂量可达4mg/d,而对生殖和发育没有不良影响。

叶酸可逆转缺乏维生素B12的症状,可使与缺乏维生素B12有关的神经病变没有得到治疗而继续发展。维生素B12缺乏最常见于老年人。

有关叶酸盐的动物毒理学研究的资料很少。

美国FNB根据LOAEL为5000μg,UF为5,将游离叶酸的UL定为1000μg,但该值只适用于纯叶酸。

同FNB一样,欧盟SCF根据LOAEL为5000μg,UF为5;或者NOAEL为1000μg,UF为1,最终制定的UL也是1000μg。除了证实大于5mg剂量时出现不良反应外,欧盟SCF还得出结论“1mg剂量的叶酸不可能掩盖恶性贫血患者的血液学症状”。1000μg这一游离叶酸的UL不适用于天然食物中存在的多谷氨酸叶酸。

同样,英国EVM制定的游离叶酸GL为1000μg。该值是根据1mg这一NOAEL以及5mg这一LOAEL,并应用相应的UF后得到的。英国EVM认为现有的数据无法制定SUL,但这一GL也是采用制定SUL的方法来制定的。

美国FNB制定的叶酸摄入量的安全范围。

(七)各国叶酸补充剂最高安全剂量的比较

美国CRN的ULS1000μg

欧盟的最高补充剂量 尚未制定(截至2004年5月)

英国EVM关于补充剂的GL 1000μg

中国营养素补充剂的最高剂量 400μg

参考文献

BaldwinJN,DalessioDJ。(1961)。Folicacidtherapyandspinal-corddegeneration inperniciousanemia。NewEnglandJournalofMedicine,264:1339~1342

BethellFH,SturgisCC。(1948)。Therelationoftherapyinperniciousanemiato changesinthenervoussystem:earlyandlateresultsinaseriesofcasesobserved foraperiodofnotlessthan10yearsandearlyresultswithfolicacid。Blood,3:57~67

BowerC,WaldNJ。(1995)。VitaminB12deficiencyandthefortificationoffood withfolicacid。EuropeanJournalofClinicalNutrition,49:787~793

ChanarinI。(1994)。Adverseeffectsofincreaseddietaryfolate。Relationtomea-surestoreducetheincidenceofneuraltubedefects。ClinicalandInvestigative Medicine,17:244~252

ChungMK,HanSS,RohJK。(1993)。Synergisticembryotoxicityofcombination pyrimethamineandfolicacidinrats。ReproductiveToxicology,7:463~468

COMA(2000)。DepartmentofHealth。ReportonHealthandSocialSubjects50. FolicAcidandthePreventionofDisease。TheStationeryOffice。London

EllisonAB,CurryAB。(1960)。Perniciousanemiamaskedbymultivitaminscon-tainingfolicacid。JournaloftheAmericanMedicalAssociation,173:240~243

HansenHA,WeinfeldA。(1962)。Metaboliceffectsanddiagnosticvalueofsmall dosesoffolicacidandB12inmegaloblasticanemias。ActaMedicaScandinavia,172:427~443

HarveyEA,HowardI,MurphyWP。(1950)。Absenceofatoxiceffectoffolicacid onthecentralnervoussystemofpersonswithoutperniciousanemia。NewEng-landJournalofMedicine,242:446~447

HeinleRW,WelchAD。(1947)。Folicacidinperniciousanemia:failuretoprevent neurologicrelapse。JournaloftheAmericanMedicalAssociation,133:739~741

KoehlerKM,Pareo-TubbehSL,RomeroLJ,BaumgartnerRN,GarryPJ。(1997)。Folatenutritionandolderadults:challengesandopportunities。Journal oftheAmericanDieteticsAssociation,97:167~173

MarshallRA。,JandlJH。(1960)。Responsesto‘physiologic’dosesoffolicacidin themegaloblasticanemias。ArchivesofInternalMedicine,105:352~360

MRCVitaminStudyResearchGroup(1991)。Preventionofneuraltubedefects:resultsofthe MedicalResearchCouncilVitaminStudy。Lancet,338:131~137

RossMD,Belding MD,PaegelBL。(1948)。Thedevelopmentandprogressionof subacutecombineddegenerationofthespinalcordinpatientswithperniciousane-miatreatedwithsyntheticpteroylglutamic(folic)acid。Blood,3:68~90

SavageDG,LindenbaumJ。(1995)。Folate-cobalamininteractions。In:Bailey,L。B。ed。FolateinHealthandDisease。MarcelDekkerInc,NewYork,237~285

SchwartzSO,KaplanSR。,ArmstrongBE。(1950)。Thelong-termevaluationof folicacidinthetreatmentofperniciousanemia。JournalofLaboratoryandClini-calMedicine,35:894~898

Vilter,R。W。,VilterC。F。,Hawkins,R。(1947)。Combinedsystem diseaseand hematologicrelapseoccurringinpersonswithperniciousanaemiatreatedwithsyn-theticfolicacid(pteroyl-glutamicacid)foraperiodoftwoyears。Journalof LaboratoryandClinicalMedicine32:1426

Vilter,R。W。,Horrigan,D。,Mueller,J。F。,Jarrold,T。,Vilter,C。F。,Hawkins,V。,Seaman,A。(1950)。StudiesontherelationshipsofvitaminB12,folicacid,thymine,uracil,andmethylgroupdonorsinpersonswithperniciousanemiaand relatedmegaloblasticanemias。Blood,5:695

Vilter,R。W。,Will,J。J。,Wright,T。,Rullman,D。(1963)。Interrelationships ofvitaminB12,folicacid,andascorbicacidinthemegaloblasticanemias。Ameri-canJournalClinicalNutrition,12:130~144

WeissbergJ,McGavackTH,VogelM,KenigsbergS。(1950)。Theeffectoffolic acidonthecentralnervoussystem ofnormalsubjectsandsubjectswithanemia otherthanperniciousanemia。Blood,5:148~154

WillJJ,MuellerJF,BrodineC,KielyCE,FiredmanB,HawkinsBR。,DutraJ,VilterRW。(1959)。FolicacidandvitaminB12inperniciousanemia:studieson patientstreatedwiththesesubstancesoveratenyearperiod。JournalofLabora-toryandClinical。Medicine,53:22~38

八、泛酸

(一)分子结构

泛酸由泛酸半酰胺与β-丙氨酸亚基连接而成。泛酰巯基乙胺由泛酸与β-巯基乙胺基连接而成。该复合物是活体组织中辅酶A(CoA)的组成成分。CoA由4′-磷酸泛酰巯基乙胺与腺苷5′-单磷酸连接组成,并由3′-羟基磷酸钠修饰。现已发现4′-磷酸泛酰巯基乙胺与多种蛋白质(尤其是与脂肪酸代谢有关的蛋白质)共价连接。

(二)膳食营养素参考摄入量(DRIs)

英国尚未制定泛酸的膳食参考摄入量。还没有证据表明一般人群中有泛酸缺乏,即使在妊娠期和哺乳期也是如此。因此认为膳食中提供的泛酸可以充分满足人体的需要量。美国提出成人泛酸摄入量为5mg/d。中国营养学会制定的成人泛酸的适宜摄入量(AI)为5mg/d,孕妇和乳母分别为6mg/d和7mg/d。

(三)可能摄入量的估计

1.国外膳食调查结果

英国

总摄入量:

膳食中摄入量 平均:5.4mg/d(1990NDNS)

97.5百分位数:9.7mg/d

补充剂 最高550mg/d

估计最高摄入量:9.7+550=559.7mg/d

2.中国膳食调查结果

尚无资料。

(四)毒理学研究

1.临床研究

(1)概述 病例报告及早期的非对照研究表明泛酸复合物(泛酸钙、泛酸钠或泛醇)在很高剂量时(在一些病例中约为10000mg/d,持续数年)不产生急性或慢性毒性反应,但高剂量时可能发生腹泻和胃肠道紊乱。近来的一些对照研究[一般是为了评价给予泛酸补充剂对特定人群(如关节炎患者)可能产生的有利作用]提示补充剂量约为2000mg/d的泛酸持续数天到数周后未出现副作用的报道。但这些研究受试人数少、研究周期短,无法发现可能存在的罕见的或长期的毒性反应,限制了这些数据的应用价值。

为研究超大剂量维生素疗法在提高41名注意力缺乏障碍儿童的行为能力方面的作用而进行的一项非盲、非随机、非安慰剂对照试验表明,经过12周多种维生素的治疗(期间泛酸钙剂量增加到1200mg/d)17名儿童的血清天门冬氨酸转氨酶浓度显著升高(提示肝脏损害)。这可能与多种维生素补充剂中的尼克酰胺有关。由于没有给予单个维生素治疗研究,这个推论还不能肯定。

(2)特别重要的临床研究 Goldman(1950)以及 Welsh(1952,1954)给予红斑狼疮患者10000mg/d或更多的泛酸补充剂可导致胃肠道症状及体征。

美国全科医师研究组(1980)进行的随机、双盲、安慰剂对照研究的目的在于评估大剂量泛酸盐补充剂在减轻关节炎患者症状方面的效果,总共47位患者(31人完成试验)接受泛酸钙治疗(每日总剂量第1~2d为500mg,3~5d为1000mg,6~9d为1500mg,10d以后为2000mg),另外47人给予安慰剂,为期8周。这些病人患有各种关节炎,其中27人患有类风湿性关节炎。据作者描述“泛酸钙组中的43人(91%)没有出现副反应,而安慰剂组中的37人(79%)无副反应。”

2.动物实验

(1)概述 由于动物数量少,因此研究泛酸及其常用剂型对实验动物毒性的数据的应用价值有限。在19世纪40年代初,Unna和Greslin报道了D-泛酸钙对小鼠、大鼠、狗、猴的急、慢性毒性试验(Unna和Greslin,1940,1941)。急性口服的LD50非常高(在大、小鼠≥10000mg?kg),致死剂量可导致呼吸衰竭进而引起死亡。1000mg?kg这一剂量对狗和猴没有毒性作用。经口给药[大鼠为500或2000mg?(kg·d),狗为50mg?(kg·d),猴为200~250mg?(kg d)]持续6个月没有产生毒性症状或体重减轻,尸检也没有发现组织病理学的改变。大鼠给予500mg?(kg·d)泛酸钙补充剂,其子代自断乳后继续给予500mg?(kg·d)的泛酸钙补充剂,未发现毒性或增重减少,也未发现组织病理学的改变。现有数据表明,泛酸及其常用剂型没有生殖和发育毒性。

(2)特别重要的动物实验 Unna和Greslin(1940,1941)报道了关于D-泛酸钙对大鼠、狗、猴(种系不明)的亚慢性毒性作用的研究。给予幼年大鼠(每组10雄10雌)50或200mg?(kg·d)的泛酸钙[约500或2000mg?(kg·d)]为期190d,其生长及发育均正常,与给予标准饲料的对照组没有明显差别。实验期结束时进行的尸检未发现脏器有任何肉眼可见的或微观的改变。给予6只成年狗和4只猴剂量分别为50和1000mg/d[相当于200~250mg?(kg d)]的泛酸钙为期6个月,在给予补充剂期间没有出现毒性症状或体重减轻。并再次报道了在实验期末进行的组织病理学检查中未发现任何改变。

3.致癌性与致畸性

泛酸钙、泛酸钠及泛醇在细菌试验中没有致遗传改变性。体内试验也没有发现遗传毒性和致癌性。

(五)相互作用

有报告指出体内其他维生素(如抗坏血酸)及其他B族维生素对泛酸有少许影响。在胃肠道和其他组织中生物素与泛酸可能有共同的载体介导的吸收机制,但其生理学上的相关性还不清楚。

早期一些报道提出高脂肪、低蛋白饮食可能加重泛酸的缺乏。

(六)摄入安全性的总评价

现有的泛酸毒理学资料有限,但病例报告及一些早期的非对照人群试验提示高剂量的泛酸复合物(约10000mg/d,在一些病例持续数年)没有急性或慢性毒作用。但这一水平的剂量常常会导致腹泻及胃肠道紊乱。最近的一些对照实验中泛酸补充剂的剂量高至2000mg/d持续数天到数周不等,没有出现副作用。这些实验的目的一般是评估泛酸补充剂对特定人群(如关节病患者)可能的有利作用。

关于泛酸及其常用剂型对实验动物的毒性的资料有限。但在饲料中给予大鼠[500和2000mg?(kg·d)],狗、猴[200~250mg?(kg·d)]的泛酸6个月后,未发生不良反应。

美国FNB和欧盟SCF未发现口服泛酸对人体不良作用的报道,因此没有制定UL。

英国EVM也未发现口服泛酸或泛酸钙对人体不良作用的报道或临床试验证据,故缺少进行危险度评定的证据,因此,英国EVM没有制定SUL,而是制定了GL。根据补充剂量在2000mg/d时没有不良反应,将UF定为10,推算得到的GL为200mg/d。

(七)各国泛酸补充剂最高安全剂量的比较

美国CRN的ULS1000mg

欧盟的最高补充剂量 尚未制定(截至2004年5月)

英国EVM关于补充剂的GL 200mg

中国营养素补充剂的最高剂量 20mg

参考文献

GeneralPractitionerResearchGroup(1980)Calciumpantothenateinarthriticcon-ditions。AreportfromtheGeneralPractitionerResearchGroup。Practitioner,224:208~211

GoldmanL。(1950)Intensivepanthenoltherapyoflupuserythematosus。Journal ofInvestigativeDermatology,15:291~293

UnnaK。,GreslinJG。(1940)Toxicityofpantothenicacid。ProceedingsoftheSo-cietyforExperimentalBiologyandMedicine,45:311~312

UnnaK,GreslinJG。(1941)。Studiesonthetoxicityandpharmacologyofpan-tothenicacid。JournalofPharmacologyandExperimentalTherapeutics,73:85~90

WelshAL。(1952)。Lupuserythematosus:treatmentbycombineduseofmassive amountsofcalcium pantothenateorpanthenolwithsyntheticvitamin E。 ArchivesofDermatologyandSyphilology,65:137~148

WelshAL。(1954)。Lupuserythematosus:treatmentbycombineduseofmassive amountsofpantothenicacidandvitamin E。ArchivesofDermatology,70:181~198

九、维生素C

(一)分子结构

维生素C是一种结构与葡萄糖有关的,含6个碳的化合物,包括了两种可相互转化的化合物L-抗坏血酸(一种强还原剂)及其氧化衍生物———脱氢型抗坏血酸。

(二)营养素膳食参考摄入量(DRIs)

1991年,COMA建议的成人维生素C的RNI为40mg/d,孕期增加到50mg/d,哺乳期增加到70mg/d。美国成年男性和女性的RDA分别为90mg/d和75mg/d,孕妇为80~85mg/d,乳母为115~120mg/d,UL为2000mg/d。中国营养学会2000年制定的成人RNI为100mg/d,中晚期孕妇和乳母为130mg/d,UL为1000mg/d。

(三)可能摄入量的估计

1.国外膳食调查结果

英国

总摄入量:

膳食 平均:64mg/d

97.5百分位数:160mg/d(资料来源于1986?87NDNS)

补充剂 最高为3000mg/d

估计每日最高摄入量:160+3000=3160mg

2.中国膳食调查结果

膳食摄入量(均数±标准差):(100.2±82.9)mg/d(资料来自第三次全国营养调查)

(四)毒理学研究

1.临床研究

(1)概述 短期内快速、大剂量服用维生素C后最常见的临床不良反应是胃肠道反应。其他的不良反应包括代谢性酸中毒、凝血活性的改变和“条件需要性”坏血病(孕期摄入过量维生素C后使其后代对维生素的需要量大于预期或推荐的每日摄入量)。

还有与尿排泄途径相关的不良反应,包括了肾结石、肾小管疾病和草酸尿。提示补充维生素C可增加维生素C的排出量,并促使尿道结石的形成,有肾结石形成倾向者对与维生素C有关的尿草酸盐的增加更为敏感。但在人群研究中未发现高维生素C摄入引起的尿草酸盐的显著增加,所报道的尿草酸盐中度增加可能是实验假象。

维生素C增加肠道对铁的摄取,尤其是血色素沉着病患者或该疾病的杂合子者。但给予健康志愿者2000mg/d剂量的维生素C 20个月或更长时间后,未发现对铁的营养状况有影响。

在两个依从性良好的试验中,服用剂量高达1000mg/d的维生素C(与其他维生素和矿物质同时服用)5年后,未有不良反应的报道。一项早期的试验报道,服用剂量大于1000mg/d的维生素C至少3年后,90人中有3人的维生素B12的浓度下降,但这些观察结果的关联性遭到质疑。

(2)特别重要的临床研究 Cameron和Campbell(1974)的递增研究中,给予健康志愿者的维生素C的剂量每周递增1000mg。当补充剂量达到3000~4000mg/d时,腹胀、胃肠胀气、腹泻和短暂性绞痛都是“相当常见”的症状。未提供其他详细资料。

在Cook等人(1984)调查膳食铁的吸收和利用对体内铁状况的影响的研究中,连续16周每日给予17名成年志愿者2000mg维生素C。9名志愿者完成了整个研究,服用该剂量的维生素C达24个月,未报道有主观副反应。尽管维生素C增加了非血红素铁的吸收,而志愿者的初始铁状况之间有较大差异,但并未发现血清铁蛋白浓度的增加。得出的结论是,维生素C的补充对铁的贮存所产生的作用微不足道。继续给4个铁缺乏和4个铁耗竭研究对象补充维生素C20个月后,体内铁的贮存(以血清铁蛋白为指标)没有明显变化,维生素C的效应增强后胃肠道也未产生适应性变化。研究者对这些结果提出了几种可能的解释。本次研究中大剂量补充维生素C后未有不良反应,但该研究并不排除维生素C对血色素沉着病杂合子者(人群中约占10%)有不良作用。该研究对象较少,铁的营养状况不同,未用盲法,但对依从性进行了控制。

Mai等人(1990)将20名多发性硬化病患者随机分成两组,连续5周分别补充2000mg/d的维生素C+6mg/d的亚硒酸钠+480mg/d的维生素E或安慰剂。给药后2周和4周分别询问病人的副反应。在10个接受有效补充剂的病人中,有一人在第2周有轻度的面部红斑,后来逐渐减退,另一人尿液有特殊气味。安慰剂组的10个病人中有3人头痛次数增加。

Urivetzky等人(1992)给予去除肾结石术2~3d后的15名肾草酸钙结石患者(研究者认为肾草酸钙结石患者是易受抗坏血酸影响的高危人群)剂量为100、500、1000和2000mg的抗坏血酸。将用肾造口术导管收集到的尿样标本加入防腐剂硫汞钠中,使抗坏血酸和草酸盐保持稳定,用亚硫酸钠去除抗坏血酸后测定草酸盐。在维生素C的剂量达到500mg及以上时,尿液中草酸盐的增加有显著性意义。研究者估计,给予维生素C1000mg,尿液中排出的草酸盐增加了6~13mg,得到的结论是补充维生素C增加了肾脏草酸钙结石的危险性。

Wandzilak等人(1994)连续5日给予15名健康志愿者每人1000、5000和10000mg维生素C,然后中断5d。在24h尿样中加入盐酸使pH下降到2,并冰冻保存。抗坏血酸盐在分析过程中可能通过非酶化途径转化为草酸盐,干扰了分析测定。这可以解释在以前的研究中所得到的草酸盐受抗坏血酸盐摄入量影响这一结果。

Levine等人(1996)以及Levine等人(1999)测定了7个健康不吸烟青年人的静态血浆抗坏血酸浓度、尿抗坏血酸和尿草酸盐浓度(后者采用酶法测定,不受抗坏血酸的干扰)。当维生素C的摄入量为1000mg/d时,尿草酸盐和尿酸的排泄量增加(尽管仍在生理范围内),且有统计学意义。

Auer等人(1998)给予10名健康男性志愿者(无肾结石形成史)剂量为4000mg/d的维生素C(分4次服用)连续5d。采用不同的尿样采集步骤在有?无EDTA作为防腐剂的情况下测定抗坏血酸。在整个过程的任一阶段含防腐剂的样本中草酸盐的排出量都没有显著增加。开始摄入维生素C后抗坏血酸的排泄量增加,但24h后达到稳定状态,提示此时代谢库达到饱和。尽管有些生化危险因素发生短暂性的显著变化,但得到的结论仍是大剂量的维生素C对与肾脏草酸钙结石形成有关的主要危险因素没有影响。

Gokce(1999)在一项随机、双盲、安慰剂对照的研究中,给予21名冠状动脉病患者口服剂量为500mg/d的维生素C30d后,一次性补充2000mg的维生素C,2h后测定研究对象的血流介导的桡动脉扩张。与连续30d补充剂量为500mg/d的维生素C的对照组相比,发现血流介导的桡动脉扩张显著增加。这种改善作用持续到连续补充维生素C500mg/d30d之后。但该报告未对不良作用进行评价。

Morton等人(2001)的回顾性队列研究由994名妇女组成,其中277人平时服用维生素C补充剂,该研究评价了补充维生素C对骨密度(BMD)的影响。维生素C,补充剂量从100~5000mg/d;平均为745mg/d,平均补充时间为12.4年。测定维生素C服用者的髋骨、腰椎和桡骨中远端的BMD。调整年龄、体质指数和总钙摄入量后,维生素C服用者的中段桡骨、股骨颈和髋骨的BMD比非服用者高3%。在调整年龄、体质指数、运动、饮酒、吸烟、经医生诊断的骨关节炎以及钙剂和多种维生素的补充、噻嗪类利尿剂、雌激素、甲状腺激素和口服皮质类固醇后,维生素C服用者的股骨颈BMD的增加仍有显著性,而整个髋骨的BMD有明显增加。未测定除BMD以外的其他指标,因此未有副作用的报道。

2.动物实验

短期大剂量给予维生素C后的毒性较低。大剂量维生素C与豚鼠的生长速率下降(50mg/d)、大鼠的胆固醇升高[150mg?(kg·d)]以及小鸡的微量元素代谢受到干扰有关。未有影响生殖和发育的报道。有报道称豚鼠对维生素C需要量条件性增加。

3.致癌性与致畸性

致癌性尚未得到证实。

体外诱变性试验有些得到阳性结果,但通常结果各异。而当维生素C与铜同时存在时,常得到阳性结果。据报道短期补充维生素C可增加DNA碱基的修饰,从而有助于维生素C发挥过氧化作用。在体外,维生素C可引起由脂质过氧化物生成的DNA活性代谢产物的增加,尚无体内诱变性的可靠证据。

(五)相互作用

维生素C可影响金属离子的吸收。

大剂量的维生素C可促进非血红素铁的吸收作用。维生素C与铁能形成可溶性螯合物,使铁在高的pH条件下也能呈溶解状态,有利于铁的吸收。维生素C还能加速铁蛋白释放铁,有利于铁的动员。

大剂量的维生素C也可影响铜的吸收。

维生素C与铅结合,形成溶解度较低的抗坏血酸铅盐,从而降低铅的吸收。铅能促进维生素C的氧化,且该过程不可逆,从而降低维生素C的生理功用。有人对17名铅中毒病人,每日给以维生素C100~200mg,经治疗数星期后,患者铅中毒症状均有缓解。

口服阿司匹林、抗生素或口服避孕药时,应增加维生素C的摄入量。服用大剂量维生素C会加重乙酰氨基酚对肝脏的损害。大剂量的维生素C还可降低华法林和肝素的功效。

(六)摄入安全性的总评价

现有的资料提示维生素C没有明显的不良作用,口服剂量的维生素C对健康人未见明确的关键毒作用终点。口服高剂量的维生素C(一般剂量达到几克)可产生胃肠道反应,但在1000mg(1g)剂量时也有报道。很少有专门研究这种不良作用的对照研究,并且这些对照研究的结果并不支持非对照的研究所观察到的其他可能的不良作用(如不孕)。

以前怀疑维生素C可能有毒副作用,如破坏维生素B12,但改进分析技术后未能证实这些不良作用。对于维生素C增加尿草酸盐排泄量这一观点仍有争议。虽然给予草酸钙结石患者大于500mg剂量的维生素C后明显增加了尿草酸盐的排出量,但有些研究认为尿草酸盐的增加可能是实验假象(Auer等人,1998)。另一方面,给予正常人4000mg/d的维生素C并不增加尿草酸盐的排出量。

潜在维生素C易感人群包括铁代谢或储存异常的患者。

有报道称维生素C有多种过氧化作用,但这一作用对一般人群的意义尚不确定。

维生素C对动物的急性毒性很小,未有影响生殖能力的报道。但高剂量的维生素C可降低豚鼠(50mg/d)的生长速率,增加大鼠血的胆固醇含量[维生素C量150mg?(kg d)]。

除大剂量时引起胃肠道不适和渗透性腹泻外,美国FNB未发现其他较为可信的不良作用的报道。针对上述作用,美国FNB将LOAEL确定为3000mg/d,由于症状较轻且持续时间短,故将UF定为1.5,因此推导出UL为2000mg/d。

英国EVM也未发现除轻度胃肠道不适和渗透性腹泻以外的有关不良反应的可信度较高的报道。故将不确定系数(UF)定为标准毒理学的默认值3,指导剂量(GL)为1000mg/d。

美国FNB制定的维生素C摄入量的安全范围。

(七)各国维生素C补充剂最高安全剂量的比较

美国CRN的ULS2000mg(每次1000mg,时间间隔≥4h)

欧盟的最高补充剂量 尚未制定(截至2004年5月)

英国EVM关于补充剂的GL 1000mg

中国营养素补充剂的最高剂量 500mg

参考文献

AuerBLAuerDandRodgersAL。(1998)Theeffectofascorbicacidingestionon thebiochemicalandphysiochemicalriskfactorsassociated withcalcium oxalate kidneystoneformation。ClinicalChemistryandLaboratory Medicine,36:143~148

CameronEandCampbellA。(1974)。Theortho-moleculartreatmentofcancer。 II。Clinicaltrialofhighdoseascorbicacidsupplementsinadvancedhumancan-cer。ChemicalandBiologicalInteractions,9:285~315

COMA(1991)。DietaryReferenceValuesforFoodEnergyandNutrientsforthe UnitedKingdom。ReportofthePanelonDietaryReferenceValues,Committee on MedicalAspectsofFoodandNutritionPolicy。HMSO,London

CookJD,WatsonSS,SimpsonKM,LipschitzDAandSkikneBS。(1984)。The effectofhighascorbicacidsupplementationonbodyironstores。Blood,64:721~726

GokceN,KeaneyJF,JrFreiB,Holbrook M,Olesiak M,Zachariah BJ,LeeuwenburghC,HeineckeJW,VitaJA。(1999)。Long-term ascorbicacid administrationreversesendothelialvasomotordysfunctioninpatientswithcoro-naryarterydisease。Circulation,99:3234~3240

LevineM,Conry-cantilenaC,Wang Y,Welch RW,WashkoPW,Dhariwal KR,ParkJB,LazarevA,GraumlichJF,KingJ,CantilenaLR。(1996)。Vita-minCpharmacokineticsinhealthyvolunteers。ProceedingsoftheNational AcademyofSciences,93:3704~3709

LevineM,RumseySC,DaruwalaR,ParkJB,WangY。(1999)Criteriaandrec-ommendationsforvitaminCintake。JournaloftheAmericanMedicalAssocia-tion,281:1415~1423

MaiJ,SorensenPS,HansenJC。(1990)Highdoseantioxidantsupplementationto MSpatients。Effectsonglutathioneperoxidase,clinicalsafety,andabsorptionof selenium。BiologicalTraceElementResearch,24:109~117

MortonDJ,Barrett-ConnorEL,SchneiderDL VitaminCsupplementuseand bonemineraldensityinpostmenopausalwomen。JournalofBoneMineralRe-search,16:135~40

UrivetskyM,KessarisD,SmithAD。(1992)。Ascorbicacidoverdosing:ariskfor calciumoxalatenephrolithiasis。JournalofUrology,147:1215~1218

WandzilakTR,AndreSD,DavisPA,WilliamsHE。(1994)。Effectofhighdose vitaminConurinaryoxalatelevels。JournalofUrology,151:834~837