葡萄糖耐量试验对于糖尿病的诊断非常重要，尤其是血糖水平已经高于正常值但又未达到糖尿病确诊标准的人来说，进行葡萄糖耐量试验则更为必要。为了保证试验结果的准确，因而在试验前和试验时应注意以下问题。
1.暂时不宜进行试验的人群。对于患有某些应激性疾病的患者，应在病情稳定或痊愈后再进行试验，以保证检测结果的准确。如正患有发热、肺炎、心绞痛、急性心肌梗死、脑血管意外伤害、严重外伤或刚进行完手术的患者，均不宜马上进行葡萄糖耐量试验。
2.某些药物对试验会产生不利影响。促肾上腺皮质激素、苯妥英钠、三环类抗抑郁药、酚妥拉明、口服避孕药、异烟肼、吲哚美辛、噻嗪类利尿剂、胰升糖素、利尿酸钠、呋塞米、可的松、可乐定、氯噻酮、儿茶酚胺、咖啡因、生长激素、醛固酮等具有升高血糖、影响糖代谢的药物，对于葡萄糖耐量试验的结果均会造成不利影响。
3.须在清晨、空腹进行葡萄糖耐量试验。必须在清晨的7～9时进行此时检测的血糖水平才是可用于诊断的数值。另外，进行葡萄糖耐量试验前，应保证已经停止进食至少8～16个小时。
4.保持情绪稳定。在进行试验前，应尽力避免情绪波动，也不要产生紧张、忧虑等不良情绪，心态的放松有助血糖水平的稳定，对于检测结果的准确性很重要。
5.准确计时进行血液抽取。在服用葡萄糖后，需要分别在此后的一个小时、2个小时和3个小时的时候进行静脉抽血用以血糖检测。而服糖后的时间计算，应从服第一口葡萄糖开始计时。
另外需要注意的是，对于已有高血糖病史或曾查出有糖耐量异常情况者，需要以100克面粉制作的馒头代替葡萄糖进行糖耐量试验。同时，如果在试验过程中，食用了其他食物、饮料或出现有恶心、呕吐等情况则应立即停止试验。