第一，母种的培养应在适宜温度下进行，一般适温为23℃~27 ℃。温度不能高，否则菌丝衰老快，易倒伏变黄。当种块上 菌丝萌发并向培养基上蔓延后，可将培养温度逐渐降低2℃~3 ℃，菌丝生长速度虽然略微减慢，但生长更加健壮。每次降 温要经过1周左右，降至12℃左右，菌丝就可长满斜面，而且 粗壮、色正。
第二，防止温度忽高忽低，温差过大试管内壁易形成水珠， 水滴接触到的菌丝便会倒伏、发黄。在自然室温较低时，可 用无菌纱布制成棉垫包住试管，或将试管分装于铝质饭盒内 ，用棉垫盖好，防止因打开培养箱时，温度急剧下降使试管 内出现冷凝水。为了防止冷凝水流到菌丝上，应将试管竖起 放入筐内或菌种架上培养，如不得已平放时，也应将试管口 稍垫高，并使斜面向下。
第三，为防止母种老化，在转接试管时，用接种钩挑取母种 块不能带培养基过厚，如果原培养基厚，萌发的菌丝不能尽 快得到新的营养而生长不良，容易老化。
第四，在母种培养期间，大量的母种不宜久放在恒温箱内培 养，应放在通气较好的恒温室内培养，如没有恒温室，放在 恒温箱中的菌种不能过多、不能过分拥挤，以防通气不良、 氧气不足造成菌丝衰老、发黄。
第五，母种培养期间要经常检查，如有杂菌污染应及时拣出 淘汰。