常压蒸汽灭菌常用于木屑种型和麦秸种型培养基的灭菌，具 体操作步骤如下：
（1）向锅内加足水，同时将预热补水的小锅内也灌满水。
（2）点火加温。
（3）将装好料的菌种瓶（袋）装入灭菌灶内，棉塞向上直立 码放，不贴四壁，中间留汽道，灭菌灶下部插入温度计。
（4）关闭灶门，加大火力，尽量在2小时内达到“圆汽”（ 即温度达到100℃），然后开始计时。一次灭菌600瓶以下， 要在100℃条件下维持8小时；一次灭菌600~1 000瓶，要在 100℃条件下维持10～12个小时。
（5）达到灭菌时间后停止加热，让温度自然下降至锅顶不再 有蒸汽上升，一般需要6～8小时。微开灶门，利用余热蒸发 棉塞表面的水分。再过1～2小时，打开灶门，取出瓶（袋） ，放入事先消过毒的洁净的冷却室。如果时间允许，可以先 闷一夜，再开灶取瓶，这样灭菌效果更好。
（6）清理干净灭菌锅内的余水及灶内杂物，将门、箅架原位 上好，以防变形。
锅内水量要足，及时补热水，防止汽量不足和烧下锅；火力 要足，不能掉火一直维持100℃；装灶不能过于密实，要留汽 道。