接种前，先将接种室（箱）消毒灭菌，方法如前。将接种工 具、母种或原种及待接的原种或栽培种培养基瓶（袋）放入 接种箱（室），进行消毒灭菌。
一人接种时，可将菌种（母科试管或原种瓶）置于固定架上 ，其高度以试管口或菌种瓶口正处于酒精灯火焰上方为准。 待接原种或栽培种培养料瓶（袋），可以置于固定菌种瓶架 上，也可以持在左手中，右手持接种工具，钩取或送接菌种 ，同时可以拔棉塞和塞棉塞。
接种方法同母种的转管扩接，用接种针或接种钩将母种斜面 划成4～6块，将菌丝连同部分培养基一起接到原种培养基中 ，每块接1瓶原种。用原种接栽培种时，也可用接种勺，取枣 核大一块原种接到栽培种培养基中。一般情况下，1支母种可 以接4~6瓶原种，1瓶原种可以接50～60瓶或30袋栽培种。