马其顿国王亚历山大在占领小亚细亚之后，于前333年夏，挥师向叙利亚北部挺进。
波斯王大流士三世为阻击亚历山大的进攻，亲率大军占据了马其顿军队后方的伊苏斯城，切断了马其顿军与小亚细亚根据地的陆上交通线。亚历山大闻讯回师，与波斯交战于伊苏斯。大流士三世集结了10万兵力并亲自督战，企图一举歼灭马其顿军。面对强敌，亚历山大以重装方阵和重装骑兵猛烈攻击波斯军的中锋。大流士三世首先动摇，扔下战弓，脱掉战袍，夺路而逃。波斯大军随即全线溃退。亚历山大进入大流士三世的军营，缴获了大批武器、财宝并俘虏了大流士三世的母亲、妻子和三个女儿。大流士三世致书亚历山大要求议和，遭到亚历山大的拒绝。
伊苏斯战役大大削弱了波斯的军事力量。