一、固定
固定的目的在于防止组织自溶并使之适于后续各处理过程。固定良好的组织应是质地略变硬但不变脆，并且收缩极轻。固定可通过浸泡或灌注进行。浸泡是常用的方式，应在组织离体后立刻开始。
选择固定剂时，应考虑各种有关因素，如所要保存的结构或成分、标本保存期等等。一般而言，10中性缓冲福尔马林是最好的通用固定剂。其优点是：保存结构最多；固定时间相对较短；固定后的标本可长期保存；穿透快而均匀，组织变硬轻微；可用其他固定剂作后固定，故也可用于电镜；可适用于多数免疫组织化学染色。故除特殊场合外，一般均选用10％中性缓冲福尔马林作固定剂。应当记住，固定液的容积必须5～10倍于标本的体积。根据组织块的大小和固定液的种类，固定时间有所不同，一般为3～24小时。
下面简单介绍常用固定剂中各种成分的作用及注意事项。
二、液体成分
1．福尔马林能保存大部分组织结构，但对于脂质，只能固定复合脂质而不能固定中性脂肪，糖类物质本身虽然固定不好，但蛋白质固定后能将碳水化合物附带保存下来。由于福尔马林属所谓软固定，故核常呈泡状，此点可用醋酸福尔马林后固定来克服。醋酸福尔马林所起的作用 类似于重金属固定，并且还能更好地保存抗原，有利于免疫组化染色。
福尔马林不能和铬酸盐混用，否则易产生甲酸。未缓冲的福尔马林也会产生甲酸。甲酸可形成酸性的福尔马林色素？穴羟高铁血红素？雪。
此处应再次强调，福尔马林是37％～40％甲醛的商品名。10％的福尔马林就是指1份37％～40％甲醛溶液加9份水配制而成的溶液，而不是指10％的甲醛。10％福马林中甲醛的实际含量为3．7％～4％。
甲醛有强烈的刺激性，对眼、鼻、喉及皮肤刺激作用尤甚，使用时应注意通风排气，减少接触时间。皮肤等沾上时要充分冲洗。
2．酒精为无色液体，可与水在任何比例下混合，它是一种还原剂，可保存糖原，但可使核变形，胞浆收缩，用于固定时以80％～95％的浓度为好。
3．冷丙酮用于某些酶组化染色（特别是脂酶、磷酸酶）。丙酮能使蛋白质沉淀，渗透力强，但对核的固定欠佳，胞浆收缩，不能保存糖原。
4．戊二醛适于电镜和酶组化。穿透缓慢，故组织必须切成约1～2毫米大小的小块，在1℃～4℃充分固定。固定后的组织可在缓冲液中保存数月。
5．醋酸不单独使用。加在可致细胞收缩的固定液中可以克服这一缺点。穿透快而完全，但溶解红细胞。用于固定的醋酸浓度是0．3％～5％。
三、固体成分
某些固体物质常加入上述固定液中，以取得更好的固定效果。
1．氯化汞可使组织形态保存更佳，但其缺点是：①必须于染色前将沉淀在组织内的汞结晶沉淀消除；②此物毒性大，不能倾入下水道。
含氯化汞的固定液有：Zenker氏液、Helley氏液、Ridley氏液、B－5固定液，含氯化汞的固定液处理时应先用硫代乙酰胺（thioacetamlde）溶液将氯化汞沉淀才能倾入下水道。方法如下：
13％硫代乙酰胺溶液的配制：13克硫代乙酰胺与100毫升蒸馏水充分混合，贮存于瓶中，盖紧瓶塞，可保存一年。
步骤（以Zenker氏液为例）：
（1）每升Zenker氏液加20毫升13％硫代乙酰胺溶液，充分混合。
（2）置于通风橱内，静止24小时或至沉淀（亚硫酸汞）出现时。注意：瓶子必须盖紧。
（3）滤过（在通风橱内进行）。
（4）滤过液可倾入下水道。汞沉淀须按有毒化学物质存放，专人处理。
2．重铬酸钾只与其他固定液配合使用。可使胞浆固定而不沉淀。固定后标本必须充分水洗以除去氯化物。
3．铬酸（三氧化铬）为强氧化剂。穿透慢，易使胞浆收缩。
4．四氯化锇细微结构保存好，故常用于电镜。
5．苦味酸可使组织变硬减轻。固定后需充分水洗，否则苦味酸与组织持续作用，并且引起嗜碱性丧失。
四、组织取材
（一）外科活体取材
1．活体小组织活体标本一般体积较小，必须尽量按切片的面进行包埋，在制片过程中应特别小心，防止丢失（常规应用绸布或擦镜纸包裹）。
2．临床手术标本多用于肿瘤组织，在取材时应注意肿瘤的部位、形状、大小、颜色以及与四周组织的关系，有无完整或不完整的包膜。测量肿瘤的体积、包括长度、宽度和高度，实质性肿瘤称其重量。
做组织包埋时取材应包括：①肿瘤本身；②与肿瘤组织相连的表面组织；③与肿瘤组织相连的底层组织；④肿瘤两侧切端组织。
（二）组织取材注意事项
1．组织新鲜立即投入固定液内，争取在术后半小时内处理完毕。
2．组织块力求小而薄脱水包埋组织块厚度不超过3mm。
3．勿使组织块受挤压切取组织块用的刀、剪要锋利，切割时不可来回挫动，切取组织时，切勿猛压，以免积压损伤组织。
4．尽量保持组织原有形状新鲜组织固定时或多或少会产生收缩现象，有时会完全变形。为此可将组织完全展平，以尽可能维持原形。
5．选好组织块的切面应熟悉器官组织的组织并据此决定其切面的走向。纵切或横切根据观察目的而定。
6．保持材料清洁组织块上如有血污、黏液、食物、粪便等，先用生理盐水冲洗，然后再入固定液。
7．切除不需要的部分特别是组织周围的脂肪组织等，应尽可能清除掉，以免影响以后的程序和观察。