一、切片刀的种类
切片刀种类多样，如不锈钢刀、硬质合金刀（碳化物刀）、钻石刀、玻璃刀、一次性刀片等等。根据不同组织及包埋剂，选择不同的切片刀。
不锈钢刀：用于石蜡切片；
碳钨刀：用于树脂包埋切片；
钻石刀、玻璃刀：用于环氧树脂包埋切片。
常用的不锈钢刀长110～250毫米。有多种型号，如：
A型：平凹型，凹度大。用于新鲜标本和软的火棉胶包埋组织块。
B型：平凹型，凹度小。用于软石蜡包埋和较硬的火棉
胶包埋切片。
C型：平楔形。用于多数石蜡切片、硬火棉胶切片及某
些塑料包埋切片。
D型：楔形，但刀面陡斜，用于塑料包埋切片。
二、磨刀
通常使用磨刀机磨刀。一般一把刀应始终用同一磨刀机磨，效果才最好，否则因为受力改变，影响刀口或缩短寿命。磨好的刀应无缺痕，刀刃两侧倾角对称。
三、切片
1．切片机有转轮式和滑动式两种
（1）转轮式：切片时组织块移动。这是最常用的切片机。
（2）滑动式：切片时切片刀移动。适宜于切大组织、全器官包埋切片等。
2．切片厚度一般6微米切片对大多数组织均适用。细胞很丰富的组织（如淋巴结）4微米较好。有时需厚切片，如欲观察淀粉样变，10微米较好；欲观察髓鞘，15微米较好。
3．组织块方位
4．修块、浸湿和冷却修去多余的石蜡（但上下面应多保留一些）。上在切片机上，调整好位置，使之与刀平行，修至组织切面完全暴露。用湿棉花浸蜡块切面30秒，将蜡块稍往后退（浸湿后组织略微膨胀），用冰冷却刀口和组织块（切脑、脊髓、淋巴结时只须冷却刀口）。脆组织和出血多的组织可用10％氯化钠等碱性液体浸湿，使之变软和防止裂开。钙化组织可用10％甲酸浸湿。
5．切片和贴片以缓慢而均匀的速度摇动手柄，太快会使切片厚薄不匀。
形成的蜡带牵引入水浴中漂浮（其温度应略高于所用石蜡的熔点），蜡带入水时应缓慢以减少气泡产生（用蒸馏水可减少气泡）。让蜡带展平，分开，然后用干净载片贴片，将载片竖立数分钟后，37℃～40℃孵箱中烤片（过夜），或至少在58℃烤箱中20～30分钟。染色前片子应冷却。
6．切片黏附剂一般用明胶或酪蛋白胶。前者用于常规石蜡切片，后者用于免疫组化。明胶可加入水浴中，酪蛋白胶须涂在载片上。水浴中加入明胶后利于细菌和真菌生长。故每天必须用次氯酸钠、肥皂水清洗。
水浴中如用自来水，应加少许盐酸（按每4000毫升水加入20毫升盐酸的比例加入）。缓慢地加酸入水，煮沸，冷却，即可用。煮沸可除去水中的二氧化碳，减少气泡形成；酸可防止金属盐在二氧化碳被除去后发生沉淀，这种沉淀可与染料结合，在切片上形成大块染料污渍。
7．封蜡块切完片后，取下蜡块，用熔化的石蜡封住切面，以便保存。
四、切片中常见的问题及原因
1．蜡带纵行裂开刀口上有污物；组织中有钙盐或异物等；石蜡中有污物或沙砾。
2．各张切片厚薄不均组织块太大；蜡块固定夹螺母未拧紧；组织太硬或未浸湿；切片刀角度不够；刀架或刀片夹生锈。
3．切片皱缩刀或组织温度太高；刀的角度不够；切片
太薄；切片机螺母未拧紧；刀钝。
4．切片中部分区域出现划痕或裂痕石蜡中有异物。
组织中有钙盐。
5．同一组织块的切片大小不等修块不当；与刀的相
对位置调整不好。
6．蜡带不平整、弯曲刀口不规则，刀与组织块不平。
7．一张切片中各处厚薄不匀或有缺损组织处理不够。
8．切片干涸、裂开组织处理不够；浸蜡包埋时石蜡温
度太高。
9．切不成蜡带刀钝；蜡块温度太高；刀的角度未调整
好；切片机各螺丝未上紧；组织处理不够。
10．刀痕刀上有缺痕。
五、切片注意事项
（一）切片修补
（1）载片损坏而盖片完好，可将切片贴于另一载片上。
（2）若盖片已损坏，如上述取掉盖片，二甲苯漂洗数次，将挠性火棉胶（flexible collodion）倒在切片上，干燥数小时，然后浸泡于蒸馏水中至火棉胶膜松动（约需5分钟至1小时）。用锋利刀片从膜一端刮起膜和组织，用细镊子夹起，放在涂有蛋清或其他黏附剂的干净载片上，丙酮滴洗数次，以除去火棉胶膜，树脂封固。
（二）重新染色
先去掉盖片，再按以下步骤操作：
（1）精纯酒精（数次）、95％酒精至蒸馏水；
（2）1％酸酒精退色；
（3）充分水洗；
（4）重新染色。
（三）盖片揭去法
切片放入二甲苯中，至盖片掉下来为止。此过程费时，可放入56℃～60℃烘箱中15～20分钟加速。以脱去盖玻片的切片，放入染缸，用二甲苯冲洗数次，不要振摇。