481.如何使用非自含式菌片？
答：非自含式菌片是指将规定的细菌均匀污染在0.5cm×2.0cm的纸片上，经干燥将其放入无菌透气性好的纸袋里，每个纸袋内放一片制作而成。使用时将两个含有菌片的纸袋放入生物监测标准包内进行灭菌，经过一个灭菌周期后取出菌片放入培养液进行培养；另用一个菌片作为对照，直接放入培养液内培养，观察并判读结果。
482.如何配制非自含式嗜热脂肪杆菌变种芽孢的培养液？
答：配制非自含式嗜热脂肪杆菌变种芽孢的培养液方法如下：取溴甲酚紫2g，溶解于100ml95%乙醇中，制成溴甲酚紫乙醇溶液（指示剂）；取胰蛋白胨10g，葡萄糖5g，溶解于1000ml蒸馏水中，调pH值至7.0~7.2，然后加入溴甲酚紫指示剂0.6ml并摇匀；将上述溶液分装到试管内，封口，用压力蒸汽灭菌后即可使用。
483.如何制作下排气压力蒸汽灭菌器生物监测标准试验包？
答：下排气压力蒸汽灭菌器生物监测标准试验包制作方法如下：用3件平纹长袖手术衣，4块小手术巾，2块中手术巾，1块大毛巾，30块10cm×10cm×8cm层纱布敷料包裹成25cm×30cm×30cm大小，将两个嗜热脂肪杆菌芽孢菌片分别装入灭菌小纸袋内，置于标准试验包的中心部位而成。
484.如何制作预真空压力蒸汽灭菌器生物监测标准试验包？
答：预真空和脉动真空压力蒸汽灭菌器生物监测标准试验包由16条全棉手术巾（每条为41cm×66cm），将每条手术巾的长边先折成3层，短边折成2层后叠放，做成23cm×23cm×15cm大小，将两个嗜热脂肪杆菌芽孢菌片分别装入灭菌小纸袋内，置于标准试验包的中心部位而成。
485.如何制作手提式压力蒸汽灭菌器生物监测标准试验包？
答：手提式压力蒸汽灭菌器生物监测标准试验包常用通气贮物盒（22cm×13cm×6cm）代替，盒内盛满中试管，指示菌片放于中心部位的两只灭菌试管内，试管口用灭菌牛皮纸包封。
486.生物监测标准试验包的布巾用后需每次更换吗？为什么？
答：生物监测标准试验包的布巾用后需每次更换。因为生物监测标准试验包的布巾使用后变硬变脏，影响蒸汽穿透，导致生物监测结果不准，故每次使用后必须洗涤，且洗涤次数一般不宜超过30次。
487.压力蒸汽灭菌器生物监测标准试验包应放在灭菌器的什么位置？
答：压力蒸汽灭菌器生物监测标准试验包应放在灭菌器排气口的上方，手提式应平放在锅底部。
488.如何制作环氧乙烷灭菌器生物监测挑战包？
答：环氧乙烷灭菌器生物监测挑战包的制作方法如下：将一生物指示剂放入一个去掉针头和针套的20ml注射器内，生物指示剂带孔的塑料帽应朝注射器乳头处，再将注射器针芯放在原位（注意不要碰及生物指示剂）；另选一成人型气管插管或一个塑料注射器（内放化学指示卡），一条长25.4cm，内径0.76cm，管壁厚1.6mm的琥珀乳胶管和4条全棉清洁手术巾（46cm×76cm），每条巾单先折叠成3层，再对折，即每条巾单形成6层，然后将叠好的巾单从下至上重叠在一起，再将上述物品放于巾单中间层，最后选两条清洁布或无纺布包裹，用化学指示胶带封扎成一个测试包。
489.如何制作环氧乙烷灭菌器生物监测常用包？
答：环氧乙烷灭菌器生物监测常规测试包制作方法：与挑战包制作方法类似，先将一生物指示剂放于一个注射器内（同上），再用一条全棉小手巾两层包裹后用纸塑包装袋封口即可。
490.监测压力蒸汽灭菌器的生物指示剂是什么？培养温度与时间是多少？
答：监测压力蒸汽灭菌器的生物指示剂是嗜热脂肪杆菌芽孢，培养温度为（56±1）℃，培养时间为48小时或7天。
491.监测环氧乙烷灭菌器的生物指示剂是什么？培养温度与时间是多少？
答：监测环氧乙烷灭菌器的生物指示剂是枯草杆菌黑色变种芽孢，培养温度为（36±1）℃，培养时间为48小时或7天。
492.监测干热灭菌器的生物指示剂是什么？培养温度与时间是多少？
答：监测干热灭菌器的生物指示剂是枯草杆菌黑色变种芽孢，培养温度为（36±1）℃，培养时间为48小时或7天。
493.监测过氧化氢等离子体灭菌器的生物指示剂是什么？
培养温度与时间是多少？
答：监测过氧化氢等离子体灭菌器的生物指示剂是嗜热脂肪杆菌芽孢，培养温度为（56±1）℃，培养时间为48小时或7天。
494.生物监测是否一定要设阳性对照？为什么？
答：生物监测一定要设阳性对照。因为只有以阳性对照菌株的正常生长为标准，才能判断经灭菌监测后的菌株是否被灭活，避免用于灭菌监测的菌株是死菌株而引起的误差。
495.如何判断生物监测结果？
答：判断生物监测结果时必须观察经培养结束后的培养基颜色或试管颜色，只有在对照试管颜色变黄的前提下，所观察的培养基或试管颜色不变，表示灭菌通过；如观察试管颜色变黄，则表示灭菌失败。
496.哪些原因会引起生物监测对照管颜色不变？
答：在判断生物监测结果时，必须保持对照管颜色变黄的前提下，判定灭菌监测结果才有效。但以下原因会导致对照管颜色不变，必须注意：
（1）菌片上微生物已死亡。
（2）培养基失效。
（3）培养器损坏，致使培养温度不是所需培养温度（如56℃/37℃）。
497.生物监测培养结果为阳性时应采取哪些措施？
答：当生物监测培养结果为阳性时必须立即采取以下措施：
（1）将所有灭菌物品收回重新处理。
（2）检查灭菌过程的各个环节如灭菌器性能、待灭菌物品装载情况和包装质量等，以找出灭菌失败的可能原因。
（3）用几个生物剂再次测试灭菌器的工作状态。
（4）在所有生物指示剂结果都呈阴性（无菌生长）之前，不使用该灭菌器。
498.为何要记录保存生物监测培养结果？
答：生物监测培养完毕后，必须保存记录灭菌指示剂所呈现的结果，包括培养日期、试验类型、生物指示剂类型及其他信息。
因为记录保存有助于在遇到问题时减少再试验的种类和数量，为查找原因提供参考；防止医院感染，保证使用灭菌物品的安全性，为举证倒置提供依据。
499.化学指示剂能代替生物指示剂吗？
答：由于化学指示剂与生物指示剂两者制备的方法与原理完全不同，前者的颜色变化并不一定完全能与微生物杀灭情况同步。化学指示剂只能指示是否达到灭菌所需的条件，即灭菌器的性能，而生物指示剂可以指示抵抗力较强的细菌芽胞的实际杀灭情况，故前者是不能代替后者的。
500.压力蒸汽灭菌时化学、生物监测的频率有何要求？
答：压力蒸汽灭菌时，每个待灭菌物品包外必须有指示胶带，包内必须放化学指示卡；预真空灭菌器每天使用前必须做B-D试验，每月不得少于1次生物监测。
501.环氧乙烷灭菌效果监测频率有何要求？
答：环氧乙烷灭菌时，每个待灭菌物品包外必须有指示胶带，包内必须放化学指示卡，每月做生物监测；如为灭菌植入型器械必须每锅次都做生物监测，并待监测结果合格后发放使用。
由于应用环氧乙烷灭菌时影响因素甚多，故建议不管灭菌何种物品，宜每次灭菌均使用生物指示剂进行生物监测。
502.环氧乙烷生物监测时应如何布点？
答：环氧乙烷灭菌生物监测时应根据环氧乙烷灭菌器的大小，选择应用不同数量的生物指示剂。美国AAMI的布点标准是：如体积＜0.453立方米，用1支生物指示剂；体积＜0.481～1.104立方米，用2支生物指示剂；体积＜1.133～2.237立方米，用3支生物指示剂；体积＜2.265～2.835立方米，用5支生物指示剂。
503.新购买或维修后的设备投入使用前应先监测灭菌效果吗？为什么？
答：新购买安装完毕或维修后的灭菌设备在使用前应验证灭菌效果。因为灭菌设备在安装完毕或维修后其参数是否稳定、性能是否完好尚不清楚。使用前进行验证的内容必须包括：灭菌过程参数的测定，如各点的温度、压力与浓度等，预真空压力蒸汽灭菌器还应进行B－D测试，被验证的灭菌器必须通过物理、化学、生物等监测，只有当三项监测都合格时才能正常使用。
504.何谓PCD监测？
答：PCD是指灭菌过程挑战装置，是对灭菌过程有一定抵抗力的模拟装置。其内部可放置化学或生物指示物，用于灭菌物品的批量监测、B-D测试、腔体器材的灭菌监测等。
505.何谓批量监测系统？
答：批量监测系统是由压力蒸汽化学指示物与配套的过程质询装置（PCD）联合使用，适用于121℃和134℃的蒸汽灭菌过程。
506.批量监测系统有何特点？
答：批量监测系统有如下特点：
（1）使空腔器械内部的灭菌效果得到准确监测。批量监测系统模拟了灭菌器内最难灭菌的状况，从而确定物品内外是否达到了灭菌水平。
（2）每个灭菌包内可不再使用化学指示卡，方便并节约成本。
（3）不需要打开灭菌包就可知道灭菌是否合格，确保使用者每次都能得到合格的物品。
（4）可重复使用，每次只需更换压力蒸汽化学指示物即可。
（5）压力蒸汽化学指示物具有粘性，可以在使用后粘贴在记录单上保存，便于质量追溯。
507.如何使用批量监测系统？
答：使用批量监测系统时，将压力蒸汽化学指示物插入配套的PCD后，装入相应的棉布袋内，置于灭菌器的底层靠近柜门和排气管处，与灭菌包一起进入灭菌程序。灭菌完毕后，取出化学指示物，进行结果判断。
508.如何判读批量监测系统的结果？
答：经过灭菌程序的压力蒸汽化学指示物上4个黄色色块全部变为黑色，则为灭菌合格；如指示物上的黄色色块未变为黑色或部分变为黑色即变色不均匀，则为灭菌不合格。
509.何谓BD模拟测试？
答：BD模拟测试是由专用的指示条和一个质询装置(PCD）构成。该过程质询装置由一个可容纳指示条的金属筒及所连的聚四氟乙烯管(PTEF）组成。
510.BD模拟测试系统有何特点？
答：BD模拟测试系统有如下特点：
（1）BD模拟测试系统确保了复杂空腔器械的蒸汽穿透效果。
（2）BD模拟测试系统是比棉布测试包更准确、更敏感、更可靠的性能测试。
（3）BD模拟测试系统可重复使用，每次只需更换专用指示条。
（4）BD专用指示条具有粘性，使用完毕可以粘贴在记录单上保存。
511.如何使用BD模拟测试系统？
答：使用BD模拟测试系统时，将专用指示条插入金属筒的固定夹子上，然后拧紧。放入相应的棉布袋中（防止取出时烫手），置于空灭菌器内运行BD程序。程序结束后取出指示条判读结果。
512.如何判读BD模拟测试结果？
答：经运行BD程序后的专用指示条上所有黄色色块均变为黑色，则为BD测试合格；如指示条上的黄色色块未变为黑色或部分变为黑色即变色不均匀，则为BD测试不合格。
513.无菌包灭菌效果监测采样应在何时进行？
答：无菌包灭菌效果监测采样应在灭菌处理后、存放有效期内进行，无菌试验合格为灭菌合格。
514.何为无菌检验？
答：无菌检验是证明灭菌后的物品是否存在活的微生物，即判定被检物品是否达到灭菌的一种试验方法。
515.无菌检验合格的标准是什么？
答：阳性对照标本经24小时培养确定有菌生长，阴性对照培养期间无菌生长；被检标本需氧菌、厌氧菌、真菌培养各在培养期间均为澄清或虽显混浊但经证明无菌生长时为被检品无菌试验合格。
516.手术植入物灭菌时有何要求？
答：美国疾病控制中心（CDC）认为，灭菌器内如有植入物需灭菌时，均应放入生物指示剂进行监测，并待培养结果为阴性时再使用。不应将植入物用瞬间灭菌法灭菌，必须使用时，应将处理时间3分钟延长至10分钟。
517.何谓可追溯性？
答：可追溯性是指通过标识可以追踪某个产品或某批产品的原始状态、生产过程和使用情况的能力。
518.工作中为何要强调可追溯性记录？
答：强调可追溯性记录是质量管理的需要。通过追溯可以分析消毒供应中心所提供无菌物品的质量，对其所存在的问题进行分析总结，进行质量改进，提高工作效率，预防质量差错事故。
通过这个记录可快速追溯到与该产品相关的所有信息：包括何时、何地、何人生产，生产过程、原材料信息，给何科室使用等等。
以便查找产生不合格的原因，采取相应的纠正措施。
519.可追溯性记录内容有哪些？
答：可追溯性记录内容有：所生产、提供、使用的无菌物品相关信息，包括灭菌日期、失效日期；灭菌器锅号、灭菌锅次、同锅次所灭菌物品、数量；灭菌程序、灭菌质量结果、操作员签名或代号；使用科室等等。