（6）手术过程中，无菌手套如有破损或污染，应立即更换。
医院感染的监测
一、标本采样要点
1.采样的时间够长，面积够宽，选样和方法要正确。
2.原则：采样后必须尽快对样品进行相应指标的检测，送检时间不得超过6小时；若样品保存于0～4℃条件时，送检时间不得超过24小时。
二、标本采样方法
1.空气采样。①采样时间：选择消毒处理后或医疗护理活动前进行采样。②采样方法：使用平皿沉降法进行空气消毒效果监测。室内面积＜30m2，设一条对角线上取3点，周边区设对角线取3点。室内面积≥30m2，手术区取3点，周边区设四角及中央共5点。采样高度为距地面1.5m，除中点外距门窗、墙壁1m，采样时将平皿盖轻轻扣放于平皿旁，暴露30分钟后盖好，将平皿放于37℃温箱中培养24小时，计算平均菌落数。③标准：细菌数≤10efU／m3。
2.无菌物品的微生物监测。①采样时间：在消毒灭菌处理后，存放的有效时间内采样。②采样方法：用无菌方法将拟检测的物品分别投入5ml的无菌生理盐水中，大件物品用无菌生理盐水的棉拭子反复涂擦采样，面积不低于25cm2，并将棉拭子投入5ml无菌生理盐水中送检。
3.物体表面的监测。①采样时间：选择消毒处理后4小时内进行。②采样面积：被采样面积不少于25cm2。③采样方法：用5cm×5cm的标准灭菌规格板，放在被检物体表面，用浸有无菌生理盐水采样液的棉拭子1支，在规格板内横竖往返各涂5次，连续采样1～4个规格板，剪去手接触部分，装入无菌管内送检，门把手等小型物体则采用棉拭子直接涂抹被检物体。④标准：细菌总数≤5cfU／cm2。
4.医务人员手采样。①采样时间：在接触病人从事医疗护理活动之前进行采样。②采样方法：被采人5指并拢，将浸有无菌生理盐水的棉拭子1支在手指曲面从指根到指端来回涂擦2次（一只手的面积大约25cm2），随之转动采样棉拭子，剪去手接触部分，放入无菌试管。③标准：细菌总数≤5efU／cm2。
5.便携式压力灭菌锅效果的监测。①工艺监测：主要项目有物品的包装，装放，排气情况，灭菌的温度，压力及时间等。②化学指示剂监测：有指示卡、指示胶带等。指示卡主要用于各种包装中心的监测，指示胶带主要用于包装的表面。③生物指示剂监测：最可靠的方法是对热耐受较强的嗜热脂肪芽胞杆菌的死亡情况来判断灭菌是否成功。
6.消毒液的监测。①监测时间：更换前使用中的消毒液。②监测方法：被检消毒液，用无菌吸管取1ml加到9ml的无菌中和剂中，于1小时内送检。
指示纸：戊二醛试纸，含氯制剂试纸，对照标准色块，检验浓度是否达标。
外科手术中的无菌操作
一、无菌操作原则
1.建立一个无菌区
无菌区内所有物品都必须是灭菌的，如稍有怀疑应立即更换。物品有下列情况者，应视为有菌，不能在无菌区内使用：①在非限制区内的灭菌敷料；②无菌包破损或潮湿；③无菌包坠落在地面上；④灭菌有效时间及效果不能肯定；⑤怀疑无菌物已被污染。
无菌区的建立应尽量接近使用时间，以减少暴露和污染的机会。
2.无菌手术衣的应用
无菌手术衣的无菌范围仅限于前身肩平面以下，腰平面以上及袖子。其他部位应视为有菌区。手术人员在穿好手术衣后，前臂不应下垂，应保持在腰平面以上。双手不应接近面部或交叉及放于腋下，应肘部内收，靠近身体。由于手术衣在腰平面以下视为有菌的，因而不应接触无菌桌及铺好的手术台。手术人员倚墙而立或靠坐在未经灭菌的地方，均是违反无菌原则的。也不应来回走动或走出手术间以外。如因手术需要移动，应面向无菌区。与另一手术人员换位时，应先退后一步，转过身，背对背地转到另一位置上。在经过来穿手术衣人员面前时，应互相让开，以免碰撞污染。
3.正确使用无菌包或无菌容器
任何无菌包及容器的边缘均应视为有菌，开包时应将包布的四角翻转并用手握住，防其滑脱污染内容物。取用无菌物时注意不触及边缘。利用包布铺无菌区时，包布的内面是无菌的，包布的外面和边缘是有菌的。若取无菌包内某种无菌物，余下无菌物仍须保持无菌时，可按原包包好，但须在4小时内应用此包内的无菌物，否则须重新灭菌。
无菌容器为盛无菌敷料、器械或药液之用。打开无菌容器时，盖子应朝上，取出无菌物后即盖好。以容器浸泡消毒用物时，须写上浸泡时间，中途投入其他器械，应重新计算消毒时间。
无菌溶液瓶一经打开，液体应一次用完，不应保留。倒液时应冲一下瓶口，冲洗瓶口的药液应弃去，以保证无菌及防瓶口杂质和玻璃碎屑。
4.无菌桌的无菌范围
无菌桌仅桌缘平面以上是无菌，桌缘平面以下，不能长时间保持无菌完整，应视为有菌。手术护士、巡回护士都不应接触无菌桌缘平面以下的桌布，以建立一个安全地带。凡坠落于手术台边或无菌桌缘平面以下的物品应视为有菌。已坠落下去的皮管、电线、缝线不应再向上提拉或再用。无菌布单被水或血浸湿时，应加盖或更换新的无菌单。
5.接触无菌区时，必须经过手臂灭菌、穿无菌衣及戴无菌手套。巡回护士取用无菌物品要用无菌持物钳夹取，并应与无菌物、无菌区保持一定的距离（约30cm），避免衣袖、衣服接触无菌物及跨越无菌区，倾倒溶液时只许瓶口进入无菌区的边缘。
6.减少空气污染、保持空气净化效果。手术室门窗应关闭，人员进出应走侧门，尽量减少在手术间内走动，避免引起阵风。手术进行中应保持肃静，避免不必要的谈话。咳嗽、打喷嚏时应将头转离无菌区，避免飞沫污染。为防手术人员滴汗，可于额部加一无茵汗带。请他人擦汗时，头应转向一侧，不使纱布纤维落入无菌区。无菌容器打开后，应及时盖好，减少暴露。
7.皮肤虽经消毒，只能达到相对无菌病人的皮肤和工作人员手臂经过消毒以后只能达到相对灭菌，残存在毛孔内的细菌对开放的切口有一定的威胁，故应注意预防污染。
在穿无菌手术衣及戴无菌手套时，手不应接触手术衣和手套的外面。戴好手套的手也不可直接接触病人皮肤。凡与皮肤接触的刀片和器械不应再用。手术进行中，如手套被撕破或被缝针、锐利器械刺破，应立即更换。针和器械也不可再用。
在进行皮肤切口前，应用无菌纱布垫遮住切口两旁，或用无菌聚乙烯薄膜盖于手术野皮肤上，经薄膜切开皮肤，以保护切口不被污染。在延长切口或进行缝合前应再用酒精消毒。
8.沾染手术的隔离技术
进行胃肠道、呼吸道、宫颈等沾染手术时，在切开空腔前应用纱垫保护周围组织，并随时吸除外流的内容物。被污染的器械和其他物品应放在污染盘内，实行隔离。污染的缝针和针持应在等渗盐水中涮洗。全部沾染步骤完成后，手术人员应用无菌水冲洗或更换手套，以尽量减少细菌的污染。
9.连台手术前台手术结束，手术人员应更换无菌手术衣及消毒手臂戴无菌手套，手术间地面及用物应用消毒液擦拭，并用紫外线照射20分钟。
二、手术室的无菌技术
1.手术室无菌操作步骤
（1）严格、明确划分四区，进入无菌区时必须更衣、换鞋、戴帽子口罩。与手术无关人员、物品不得进入无菌区。
（2）手术人员应保持良好健康状况及身体清洁。
（3）所有手术人员均应更换洁净的衣裤、鞋帽、口罩，刷手、穿无菌手术衣、戴无菌手套。中途离开再次返回者应重新刷手和更衣。
（4）手术衣的无菌范围为身体前面肩以下、腰以上及袖子；穿戴好手术衣后前臂应保持在腰水平以上，肘部内收，不能下垂；任何无菌物品不能低于腰以下或手术台面以下；手套、手术衣及手术用物如有污染、破损、浸湿时应立即更换。
（5）所有手术人员应面对无菌区，交换位置时应先后退一步，转过身背对背移动。
（6）除手术区外，病人身体应用无菌单遮盖。
（7）一切手术器械和物品在使用前应做严格的消毒灭菌并保持无菌状态。任何被污染或怀疑有被污染可能的物品均视为污染。一般无菌物品5月1日～10月1日有效期为1周，10月1日～5月1日为2周。打开的无菌包、无菌容器若在4个小时内不能用完需要重新消毒灭菌。
（8）无菌台台面以上为无菌区，台边缘以下视为有菌。
（9）一份无菌物品只能用于一个病人。
（10）手术间内人员不可在无菌区中间穿行，或在无菌区内讲话、咳嗽。未刷手人员应与手术台保持一定距离。
2.无菌物品的准备